MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的临床观察及基于TGF-β1、Smad3信号通路的调控机制研究

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目的:观察应用MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡创面的临床疗效;运用Western-blot及常规病理技术探讨MEBT/MEBO促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法:(1)临床研究:将符合糖尿病足溃疡诊断的患者60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组外敷美宝湿润烧伤膏,对照组外敷贝复济。分别记录两组患者治疗第7天、第14天、第28天创面愈合率,观察治疗42天后两组患者临床疗效及两组患者创面愈合时间,评价其疗效、安全性。(2)动物实验:将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(各20只)。各组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷美宝湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。用药第5天、14天,各组分别处死10只大鼠,利用光镜观察溃疡创面组织形态学结构,Western-blot法测定TGF-β1、Smad3、P-smad3蛋白的表达量。结果:(1)临床研究:治疗第14天、第28天,观察组与对照组对比,患者创面愈合率提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在经过42天治疗后,观察组患者临床疗效优于对照组(P<0.05)。观察组患者创面愈合时间比对照组患者创面愈合时间短(P<0.05)。MEBO组未见明显毒副作用或不良反应。(2)动物实验:连续换药第5天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量均显著提高(P<0.01);与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量略高(P>0.05)。第14天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量均显著降低(P<0.01);且与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量略高,但差异无统计学意义(P>0.05)。用药第5天,MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞、毛细血管新生情况优于模型组,炎症细胞较模型组少,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;用药第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,可见皮肤附属器,空白对照组胶原纤维增生明显但排列紊乱,模型组胶原纤维呈团状增生。结论:MEBT/MEBO可能通过动态调节TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,从而起到促进糖尿病足溃疡愈合的作用,同时在一定程度上减少瘢痕形成。本研究结果表明MEBO对糖尿病足溃疡的防治具有一定的疗效。
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