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目的:探讨PD-L1表达对胃癌细胞MKN45和SGC7901的迁移、侵袭、粘附等生物学行为的影响,并初步探讨PD-L1表达对上皮间质转化(EMT)相关蛋白及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。方法:首先采用Western blot和qRT-PCR两种方法鉴定MKN45、SGC7901两种胃癌细胞PD-L1的表达。再利用Western blot和qRT-PCR两种方法对所设计的3种PD-L1-si RNA序列进行筛选,选取最佳的PD-L1-si RNA序列用于后续实验。用最佳的PD-L1-si RNA和NC-si RNA分别对两种胃癌细胞进行干扰,通过Western blot和qRT-PCR两种方法进行干扰验证。将实验分为control组、si-NC组、si-PD-L1组。采用Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验及MTT实验检测两种胃癌细胞各组的迁移、侵袭和黏附能力。采用Western blot和qRT-PCR两种方法检测两种胃癌细胞各组EMT相关蛋白(E-cadherin、Vimentin、Snail)的蛋白和mRNA表达水平。采用Western blot和qRT-PCR两种方法检测两种胃癌细胞各组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白(GSK-3β、β-catenin、c-myc)的蛋白和mRNA表达水平。结果:PD-L1在MKN45和SGC7901两种胃癌细胞中均高表达。利用筛选出的最佳PD-L1-si RNA成功构建出PD-L1沉默表达的胃癌细胞模型。Transwell迁移实验结果显示,两种胃癌细胞的si-PD-L1组迁移率明显低于其他两组(F值分别为84.631、301.046,均P<0.001)。Transwell侵袭实验结果显示,两种胃癌细胞的si-PD-L1组侵袭率明显低于其他两组(F值分别为19.371、47.001,均P<0.05)。MTT实验结果显示,两种胃癌细胞的si-PD-L1组粘附率明显低于其他两组(F值分别为79.869、42.101,均P<0.01)。Western blot方法检测两种胃癌细胞control组、si-NC组、si-PD-L1组3组EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail的表达,结果显示:si-PD-L1组和其他两组相比,蛋白表达量差异显著(FMKN45-E-cadherin蛋白=127.708,FSGC7901-E-cadherin蛋白=79.625,FMKN45-Vimentin蛋白=85.259,FSGC7901-Vimentin蛋白=59.608,FMKN45-Snail蛋白=57.170,FSGC7901-Snail蛋白=149.758,均P<0.05);利用qRT-PCR方法从mRNA的角度对EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail进行检测,结果显示:si-PD-L1组和其他两组相比,mRNA表达量差异显著(FMKN45-E-cadherin mRNA=477.171,FSGC7901-E-cadherin mRNA=292.801,FMKN45-Vimentin mRNA=65.965,FSGC7901-Vimentin mRNA=64.091,FMKN45-Snail mRNA=145.091,FSGC7901-Snail mRNA=25.551,均P<0.05);其中,si-PD-L1组E-cadherin的蛋白和mRNA表达量高于其他两组,Vimentin和Snail的蛋白和mRNA表达量低于其他两组(均P<0.05)。Western blot方法检测两种胃癌细胞control组、si-NC组、si-PD-L1组3组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、β-catenin、c-myc的表达,结果显示:si-PD-L1组和其他两组相比,蛋白表达量差异显著(FMKN45-GSK-3β蛋白=264.262,FSGC7901-GSK-3β蛋白=15.557,FMKN45-β-catenin蛋白=323.557,FSGC7901-β-catenin蛋白=115.931,FMKN45-c-myc蛋白=121.703,FSGC7901-c-myc蛋白=163.183,均P<0.05);利用qRT-PCR方法从mRNA的角度对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、β-catenin、c-myc进行检测,结果显示:si-PD-L1组和其他两组相比,mRNA表达量差异显著(FMKN45-GSK-3βmRNA=41.693,FSGC7901-GSK-3βmRNA=64.132,FMKN45-β-catenin mRNA=88.069,FSGC7901-β-catenin mRNA=103.791,FMKN45-c-myc mRNA=208.368,FSGC7901-c-myc mRNA=73.055,均P<0.05);其中,si-PD-L1组GSK-3β的蛋白和mRNA表达量高于其他两组,β-catenin和c-myc的蛋白和mRNA表达量低于其他两组(均P<0.05)。结论:本研究证实了两种胃癌细胞的迁移、侵袭及粘附能力的变化受PD-L1表达的调控。PD-L1表达的高低影响EMT和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。PD-L1的表达促进上述两种胃癌细胞的迁移、侵袭及粘附等生物学行为,其初步机制可能与其调节胃癌EMT相关蛋白及Wnt/β-catenin信号通路有关。