1研究目的五指毛桃(Radix Fici)为桑科植物粗叶榕(Ficus hirta Vahl.)的干燥根,具有健脾利湿、益肺止咳、舒筋通络的功效,常用于脾虚浮肿、食少无力、肝炎、风湿痹痛、肺痨咳嗽等症;另外还可用以酿酒、煲汤和茶饮。是既是药品又是食品的极具开发潜力的资源之一。本课题的研究目的,一是探讨五指毛桃水煎液补脾健脾作用,为临床运用提供理论基础;二是观察五指毛桃水煎液对小鼠的急性毒性作用及最大耐受量,为临床安全用药提供参考依据;三是建立河源地区五指毛桃药材的高效液相色谱质控图谱及薄层色谱质控图谱。2研究方法本课题主要分两部分进行研究,第一部分为文献整理研究:以查阅国内外有关文献为基础,了解五指毛桃的研究进展情况。第二部分为实验研究,包括:主要药效学研究、毒性试验研究、质控图谱实验研究。(1)通过急性毒性和最大耐受量试验方法,观察小鼠死亡、活动及饮食情况,并通过解剖观察心、肝、脾、肺、肾、胰腺、小肠等脏器有无异常及病理学检查,来确定五指毛桃是否有毒和最大给药剂量。(2)采用大黄复制脾虚证模型小鼠,以小鼠的一般体征变化、体重增长、脾脏指数和胸腺指数、血清淀粉酶活性、胃排空、肠推进速度、耐缺氧、抗寒耐疲劳等为指标,观察五指毛桃水煎液对脾虚模型小鼠的影响。(3)通过高效液相色谱法和薄层色谱法对河源地区五指毛桃进行专属质控图谱研究。3研究结果3.1文献研究结果文献研究表明,对于五指毛桃的研究多数是有关其化学成分的研究,关于其药理作用的研究较少,尤其是对于补脾的药理作用还没有报道;有关五指毛桃的毒性一直以来都是经验认为,没有实验数据的支持;有文献报道通过HPLC、GC-MS等研究结果显示河源地区的五指毛桃相对于其他地区质量好,补骨脂素含量高,所以有必要对该地区的药材进行专属质控图谱研究。3.2实验研究结果(1)药效学实验研究表明,五指毛桃水煎液对大黄型脾虚模型小鼠的血清淀粉酶含量有一定的提高作用(P<0.05),对大黄型脾虚模型小鼠胃排空速度及小肠推进速度加快有一定的缓解作用(P<0.05～0.01),有一定抑制模型小鼠小肠蠕动的作用(P<0.05),可以延长大黄型脾虚模型小鼠在常压缺氧下的存活时间(P<0.01～<0.05),能增加大黄型脾虚模型小鼠的胸腺重量(P<0.05),能延长大黄型小鼠在低温状态下的游泳时间(P<0.05),也可以增加大黄型脾虚模型小鼠的体重(P<0.01)。通过对大黄型脾虚模型小鼠各个指标的影响,为五指毛桃具有补脾作用提供理论支持。(2)急性毒性试验结果显示,3个剂量组的小鼠给药后3d均无死亡,活动及饮食均正常。最大耐受量试验中小鼠均于药后活动稍有减慢,30min后则恢复正常,药后14d内,动物均无死亡,眼、鼻、口无粘液性分泌物,体重、饮水量及进食量与对照组比较统计学分析结果均无显著差异(P>0.05)。最大给药量达到成人日用剂量的370倍。病理检查结果:肉眼观察到心、肝、脾、胃、肺、肾、胰腺、大肠、小肠等脏器大体外观、色泽、大小均无异常;病理检查给药组小鼠各脏器均未见药物病理性改变。(3)高效液相实验结果:得到的HPLC指纹图谱中有13个峰是9批样品的共有峰。不同批号的五指毛桃药材之间相似度较高都大于0.9,说明这些五指毛桃药材化学组成一致性较好。河源地区五指毛桃无论是野生还是基地种植,质量都比较稳定。(4)薄层色谱实验结果:各供试品色谱中,在与对照品相同的位置上,显相同颜色的斑点,说明分离出了补骨脂素。五指毛桃经甲醇提取后的杂质比乙醚提取的少些,表现在色谱中显示的斑点少,且图谱中各斑点分离效果较好。4研究结论本文通过药效学实验表明五指毛桃水煎液具有良好的提高脾虚小鼠各项指标的作用,可以改善大黄型脾虚模型小鼠的脾虚症状,为其具有补脾作用提供了理论基础。而且具有安全性高的优点,药理安全性实验结果提示其在正常口服剂量的情况下毒性极低,对机体各个脏器的影响十分轻微甚至没有。指纹图谱实验研究结果显示本高效液相色谱方法简单、快速、精确、重现性良好,可用于河源地区五指毛桃的质量控制。所采用的薄层色谱鉴别方法分离效果好、专属性强、重现性好、灵敏度高,可作为五指毛桃的质量控制方法之一。本次研究药效机理部分尚未全面,如是否补骨脂素为补脾的有效成分还需进一步的研究。