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背景肝脏恶性肿瘤的病发率和病死率极高。根据目前最新的文章研究,肝细胞癌(HCC)在所有的癌症中病死率是排名第四,也同时是全球排第六的最常见癌症。更有甚者,由于慢性乙型肝炎在中国的高发,中国诊断的肝癌病人占有全球肝癌病人的百分之50。早期肝癌并无明显症状,而我国的体检并不像其他国家那么普及,大多病人确诊时已是癌症晚期阶段,已丧失手术机会或者预后极差。而在肿瘤化学治疗方面,HCC并不如乳腺癌或肺癌那样有着匹配良好的数个治疗靶点和高效化学治疗药,如此一来探究HCC的致癌致瘤的分子水平机制,寻找全新的预后标志物和靶向治疗显得尤为重要。长链非编码RNA(LncRNA)为一些长度大于200核酸单位的RNA,且它们并不直接编码产生蛋白质。LncRNA有多个种类,其中的FOXD2-AS1已被多次研究报告在大肠癌和胃癌中有明显促癌机制,但HCC中的具体机制与具体结合靶向并未系统阐述过。本课题研究目标在于探索FOXD2-AS1如何调控肝细胞癌发生发展及其进一步的机制。方法获得105例最终诊断为肝细胞癌的病患肝癌组织及其相应癌旁组织,运用RT-PCR检测方法检测FOXD2-AS1在肝癌组织和癌旁组织中的表达水平,获取数据的同时,使用SPSS 19.0软件分析FOXD2-AS1的表达高低与患者预后和生存时间的关系。构建瞬转或稳转的FOXD2-AS1敲低细胞系。使用cck8实验,集落形成实验,EdU荧光成像实验以及测定细胞周期实验综合判断敲低FOXD2-AS1后对细胞生长的影响。获得现象实验结果后推测并应用WB蛋白印迹实验、RNA Pull-down和CHIP实验来寻找FOXD2-AS1的信号通路变化。最后,敲低CDKN1B进行拯救实验验证与FOXD2-AS1对肝细胞癌的相关作用。结果RT-PCR实验方法表明,与癌旁肝正常组织相比,1ncRNA FOXD2-AS1在肝细胞癌组织中呈现明显高表达。统计学测算FOXD2-AS1表达高的患者的术后存活期少于低表达组(P<0.05)。对HCCLM3和Huh7两种细胞系进行FOXD2-AS1敲低后的体外实验,FOXD2-AS1干扰组的增殖功能明显减弱,且FOXD2-AS1敲低后出现细胞g0/g1期的阻滞。裸鼠体内实验中,敲低后的肝癌细胞增长成瘤能力较对照组有一个明显下降,表明体内FOXD2-AS1低表达也能够显著降低肝癌的细胞增长与细胞成瘤能力。在探讨机制的相关实验中,FOXD2-AS1直接与EZH2(RNA结合蛋白)相互作用,从而和相关周期蛋白CDKN1B呈负相关关系。结论FOXD2-AS1在肝细胞癌的组织中表达水平增高,且FOXD2-AS1表达量的高低会与肝细胞癌病人的预后与生存时间紧密相关。FOXD2-AS1通过调节细胞周期的转化从而提高细胞增殖能力。在机制研究中,FOXD2-AS1通过直接结合EZH2来沉默CDKN1B从而降低肝癌细胞发生发展过程。FOXD2-AS1有望成为肝细胞癌辅助临床诊断与靶向治疗的新靶点。