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基于次生代谢物的动植物间的协同进化一直是生物学领域的研究热点。植物通过分泌次生代谢物来影响植食性动物的取食,而植食性动物则可以通过各种机制来缓解植物次生代谢物对自身的影响。单宁酸是一种具有苦涩味的植物次生代谢物,至今无人研究单宁酸对动物味觉系统及调控动物食欲与取食行为的脑肠轴的作用。本实验是用捕捉自内蒙古草原并在室内进行配对繁殖的布氏田鼠做为研究对象,口腔连续(1d、5d、10d和20d)滴灌500μL不同浓度单宁酸溶液(0mg·mL-1、30mg·mL-1和60mg·mL-1,分别为对照组、低剂量组和高剂量组),测定布氏田鼠20d内的体重和日取食量的变化,用ELISA法测定布氏田鼠血清六种脑肠肽(五种为抑食激素,即胰多肽、肽YY、胃泌素调节素、胰高血糖样肽-1、胆囊收缩素;一种为促食激素,即胃饥饿素)水平的变化,用实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测布氏田鼠舌组织味觉受体 T2R38(Taste Receptor Family 2 members,T2R)、T2R106 和 α-味导素(α-gustducin;又为 Guanine nucleotide binding protein alpha transducing 3,Gnat3)mRNA 的表达量,用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)观察舌组织前部、中部和后部 T2R38、T2R106 和 GNAT3蛋白的表达,以确定单宁酸对布氏田鼠舌部味觉感受系统及食欲相关脑肠肽水平的影响,揭示动物味觉系统对单宁酸的感受方式,探讨单宁酸影响动物取食行为的味觉机制,为草食动物与植物次生化合物间的协同进化提供新的理论依据。研究结果如下:1、雌雄布氏田鼠口腔滴灌不同剂量TA溶液20d,隔天称量布氏田鼠的体重共11次,结果发现每个时间点各剂量组布氏田鼠的体重没有显著性差异(P>0.05),表明口腔滴灌一定剂量的TA溶液并不影响布氏田鼠的体重。2、口腔滴灌不同剂量TA溶液5 d和10 d后,低剂量组与高剂量组雌雄布氏田鼠的取食量均显著低于对照组(P<0.05);但处理20d后,各组布氏田鼠的取食量没有显著差异(P>0.05)。3、给雌雄布氏田鼠口腔滴灌不同剂量的TA溶液处理1d、5 d、10 d和20 d后,低剂量组和高剂量组血清胰多肽、肽YY、胃泌素调节素、胰高血糖样肽-1和胆囊收缩素等抑食激素的水平,均显著高于对照组(P<0.05);而低剂量组与高剂量组血清中促食激素胃饥饿素的水平在不同剂量TA处理1d、5 d和10d后,均显著低于对照组(P<0.05),但处理20 d后则与对照组相比没有显著性差异(P>0.05)。4、RT-qPCR结果表明,布氏田鼠舌组织T2R38、T2R106和Gnat3 mRNA的表达量,不同剂量TA处理1d、5 d、10 d和20 d后,低剂量组和高剂量组的表达量均显著高于对照组(P<0.05),且高剂量组的表达量显著高于低剂量组(P<0.05)。5、免疫组化结果表明,布氏田鼠舌组织的前部和中部并不表达T2R38和T2R106,只在舌后部表达这两种基因,但GNAT3在舌组织的三个区域均有表达。不同剂量TA处理四个时间段后,低剂量组和高剂量组舌后部T2R38和T2R106的表达量均显著高于对照组(P<0.05),且高剂量组的表达量显著高于低剂量组(P<0.05);舌前、中、后部GNAT3的表达量均显著高于对照组(P<0.05),且高剂量组的表达量显著高于低剂量组(P<0.05)。上述结果提示,单宁酸在较短时间内能够抑制布氏田鼠的取食量,但是随着处理时间的增加,对布氏田鼠的取食量没有显著性影响。布氏田鼠舌部的两种苦味受体和α-味导素参与该动物对单宁酸苦涩味的感受;摄入单宁酸一定时间后,布氏田鼠促食欲脑肠肽分泌减少,而抑食欲脑肠肽分泌增加。这些变化可能通过摄食中枢影响布氏田鼠的取食。