基质金属蛋白酶抑制剂GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ、MMP2/9InhibitorⅡ对人晶体上皮细胞移行的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenruozhu
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目的:比较三组基质金属蛋白酶抑制剂GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ对人晶状体上皮细胞(1ens epithelial cells,LECs)移行的抑制效果以及对细胞活性的影响,期望寻找出一种能安全有效预防后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)的药物。方法:体外培养LECs,取传至3-4代的细胞培养于6孔板中,当细胞大部分融70%合后改用无血清培养基作用12h,分别加入不同浓度(0.25,0.5,1,2,4,8,16,32,64,128μmol/L)GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ,以基础培养液培养的细胞作对照组,用200μl无菌枪头在细胞层中划出一条两边平行的无细胞区,继续培养24h,计算每组细胞移行的平均距离及抑制率。在测定细胞活性时,取传至第2代或第3代LECs,把细胞密度调整为5×105个/ml,接种至96孔板,200μl/孔,培养箱中常规培养24 h,分别加入128μmol/L的GM6001、64μmol/L的MMP2/9InhibitorⅠ和32μmol/L的MMP2/9InhibitorⅡ,以基础培养液培养的细胞作对照组,培养24 h后用MTT法测定吸光度(OD)值,分析细胞活性。结果:(1)细胞生长状态良好,排列不规则,贴壁生长呈梭形或多边形。(2)细胞经不同浓度的GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ作用时均为随着浓度的增大,移行距离逐渐减少,呈剂量依赖性,秩相关指数rs分别为0.847、0.856和0.9016,均>0.5。(2)MMP2/9InhibitorⅡ组细胞移行的平均距离明显低于其余三组:对照组细胞移行的平均距离设为1,当细胞经32μmol/L的三组抑制剂作用时,GM6001组、MMP2/9InhibitorⅠ组和MMP2/9InhibitorⅡ组细胞移行的平均距离分别为:0.478±0.091、0.294±0.088和0.191±0.081,差异有统计学意义(F=116.031,P<0.01)。(3)四组细胞的活性无明显差异,对照组、GM6001组、MMP2/9InhibitorⅠ组和MMP2/9InhibitorⅡ组的OD值分别为0.607±0.0163、0.567±0.0151、0.583±0.0103和0.595±0.0138,总体差异无统计学意义(F=1.403,P>0.05)。结论:三组抑制剂均可有效地抑制制LECs的移行,且没有明显影响细胞的活性。其中,MMP2/9InhibitorⅡ的抑制作用最明显,可能为临床上药物预防后囊膜混浊提供参考。
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