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目的：冠心病(Coronary heart disease,简称CHD)是威胁人类健康的重要疾病,他属于祖国医学“胸痹心痛”范畴,是当今世界威胁人类健康的主要疾病之一,流行病学结果显示,今后20多年中,冠心病发病和死亡率在世界范围内仍呈上升趋势,并且发病年龄越来越年轻。目前治疗冠心病耗资巨大,花费的资金已成为世界各国严重的医疗负担。但是我们对冠心病的病因及发病机制迄今尚未阐明,动脉粥样硬化是其主要的病理生理改变过程,与之相关而产生的心脑血管意外在发达国家和我国死亡率占第一位。如果CHD的发病年龄较轻(男性≤55岁,女性≤65岁)称为早发冠心病[1]。过去50年来的临床和流行病学研究证明,冠心病可能是受各种环境损害与复杂的遗传基础相互作用而引起的具有不同原因的疾病,早发冠心病(PCHD)的发生和发展亦与多种环境因素和遗传因素相关,中医认为其病因有正虚、痰浊、瘀血、气滞、寒凝之不同,但其总的基本病机则是心脉瘀阻[2]。血瘀证是冠心病最常见的证型之一[3]。所以,研究CHD的危险因素对于开展有针对性地高危的人群(如冠心病家系)预防,延缓或防止冠心病的发生发展,达到征服冠心病目的,已成为一项全球性的社会经济热点问题。表观遗传学(或表遗传学)是指不涉及DNA序列改变的,但通过DNA甲基化、组蛋白修饰及染色质结构的重塑来调控基因表达和功能的可遗传的和可逆的变化[4]。目前的研究多基于这些基因的多态性与早发冠心病之间相关性的研究,基因多态性的表现反映了基因的选择性表达,而DNA甲基化(DNA methylation)是表观遗传学最早发现的修饰途径之一,能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。换言之,DNA甲基化决定了基因的表达与否。因此,他能在更深层次上揭示早发冠心病(血瘀证)在表观遗传学方面的本质。目的：通过观察早发冠心病血瘀证、非血瘀证患者及健康成年人血液样本中基因启动子区甲基化的状态,采用焦磷酸测序(Pyrosequencing)方法检测并比较湖南汉族地区人群中早发冠心病血瘀证血瘀证患者、非血瘀(痰浊)证患者及健康人外周血中ER-α、Gp6、AGTRAP基因的甲基化状态,并分析他们与PCHD的相关性及其在早发冠心病血瘀证中的易患影响。方法：本研究采用病例对照设计,选择纳入2012年11月至2014年7月在长沙市各大社区医院(湘潭社区、黑石(?)社区、三真卫生社区等)就诊和组织义诊的经冠脉造影证实的冠心病患者24例,分为冠心病血瘀证组(A)16例,冠心病非血瘀(痰浊)证组(B)8例,另选取正常对照组(C)8例(经临床血液流变学、血糖、血脂、心电图、胸片、肝肾功能等体格检查诊断属健康者)。用焦磷酸测序(Pyrosequencing)方法分析三组病例外周血中ER-α、Gp6、AGTRAP基因启动子区域的甲基化状态。用SPSS17.0统计软件分析它们与早发冠心病血瘀证之间的相关性。结果：1)ER-a基因启动子区甲基化阳性者在早发冠心病血瘀证组(A)、冠心病非血瘀(痰浊)证组(B)、正常对照组(C)三组成员的外周血液标本中共有8例,占总人数的25%；其中早发冠心病血瘀证组(A)患者血液标本的甲基化阳性例数为4人,其甲基化阳性率为12%；非血瘀证(B)组患者血液标本的甲基化阳性例数为3人,其甲基化阳性率为8%,两组甲基化阳性率比较有统计学意义(p<0.05)；健康人组血液标本的甲基化阳性例数为1人,其甲基化阳性率为3%,与早发冠心病血瘀证组相比,其差异具有统计学意义(P<0.05)。2) Gp6基因启动子区甲基化阳性者在早发冠心病血瘀证组(A)、冠心病非血瘀(痰浊)证组(B)、正常对照组(C)三组成员的外周血液标本中共有16例,占总人数的50%；其中早发冠心病血瘀证组(A)成员血液标本的甲基化阳性例数为11人,其甲基化阳性率为70%；非血瘀证(B)组成员血液标本的甲基化阳性例数为5人,其甲基化阳性率为56%,两组甲基化阳性率比较有统计学意义(p<0.05),健康人组血液标本的甲基化阳性例数为1人,其甲基化阳性率为14%,与早发冠心病血瘀证组相比,其差异具有统计学意义(P<0.05)。3) AGTRAP基因启动子区甲基化阳性者在早发冠心病血瘀证组(A)、冠心病非血瘀(痰浊)证组(B)、正常对照组(C)三组成员的外周血液标本中共有10例,占总人数的33%；其中早发冠心病血瘀证组(A)患者血液标本的甲基化阳性例数为6人,其甲基化阳性率为35%；非血瘀证(B)组患者血液标本的甲基化阳性例数为2人,其甲基化阳性率为29%,两组甲基化阳性率比较没有统计学意义(P>0.05)；健康人组血液标本的甲基化阳性例数为2人,其甲基化阳性率为21%,与早发冠心病血瘀证组相比,其差异不具有统计学意义(P>0.05)。而对于性别,吸烟,相关病史等一般情况的比较中没有发现显著性差异(P>0.05)。基因多态性：ER-a基因多态性位点rs117301G等位基因可能是早发冠心病血瘀证发生发展的危险因素之一,而rs116401位点单核苷酸多态性可能与早发冠心病血瘀证发生无显著性差异或相关性。GP6基因SNP位点rs4861和rs4081两个位点的等位基因分布在早发冠心病血瘀证组非血瘀证组和健康成年人对照组中比较无显著性差异和统计学有意义(P>0.05)。说明GP6基因SNP位点rs4861和rs4081单核苷酸多态性有可能是早发冠心病血瘀证的非易感基因。结论：1.ER-α基因在早发冠心病患者(男≤55岁,女≤65岁)中高表达,但是在大于此年龄后的患者中这种情况消失。此种改变可能导致了ER-α基因在早发冠心病进程中的不同作用,ER-α基因启动子区域甲基化状态升高可能导致了早发冠心病血瘀证的发生和发展。2.GP6基因、AGTRAP基因在焦磷酸测序的实验中显示其甲基化水平显著升高,这种升高出现尤其出现在早发冠心病血瘀证患者的外周血液当中,提示其甲基化状态可能和早发冠心病血瘀证的发生具有相关性。3.基因多态性：研究和探讨ER-α基因位点rs117301和GP6基因的位点rs4861单核苷酸多态性与早发冠心病血瘀证之间的相关性,结果发现ER-α基因位点rs117301可能和早发冠心病血瘀证的发生发展具有相关性,结果有统计学意义(p<0.05),GP6基因的位点rs4861单核苷酸多态性早发冠心病血瘀证不具有相关性,可能不是早发冠心病的易感基因和危险因素。