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肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,据世界卫生组织2014年统计,在我国男性或女性中,肝癌的发病率均位居前五位。转移是导致肝癌症复发及致死的重要原因之一,研究肝癌转移的分子机制刻不容缓。糖基化修饰作为蛋白质转录翻译后一种重要的修饰方式,在蛋白质合成、正确折叠、细胞识别等过程中发挥重要的生物学功能。糖基化修饰主要由糖基转移酶糖基催化完成。糖基化修饰异常,即糖基转移酶表达异常及糖链结构异常是恶性肿瘤发生发展及转移的共同特征。唾液酸是一类九碳酸性糖的总称,一般连接于糖蛋白和糖脂糖链的末端,介导或调控炎症、病原感染、肿瘤发生发展及转移等诸多病理过程。α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gall)是脊椎动物唾液酸转移酶家族成员,催化活化的唾液酸以α-2,6连接糖苷键与半乳糖共价结合。本实验室的前期研究发现：上调ST6Gall及其催化产物α-2,6连接唾液酸的表达,促进小鼠肝癌细胞经淋巴道的转移潜能。miRNA是真核生物中一类内源性具有调控功能的非编码RNA,通过与靶基因3’UTR区域特异结合进而抑制靶基因的表达和相关功能,参与细胞发育、增殖、凋亡等过程。文献报道及本实验的研究结果表明：靶向糖基转移酶的miRNA调控糖基转移酶的表达并改变细胞表面糖蛋白糖基化的修饰。但是,miRNA对ST6Gal1表达及其催化产物α-2,6连接唾液酸生成的调控作用,尚未见报道。本研究以无、低、高淋巴道转移潜能的小鼠肝癌细胞Hepal-6、Hca-P、Hca-F为对象,基于本实验室前期完成的上述三种细胞高通量芯片分析miRNA表达谱,筛选与转移潜能相关表达显著差异的miRNA,并应用qPCR、免疫印迹分析和流式细胞分析术等方法验证,发现：miRNA-9的表达量与小鼠肝癌细胞淋巴道转移潜能、ST6Gal1及其催化产物α-2,6连接唾液酸的表达呈负相关。双荧光素酶报告基因分析结果表明,miRNA-9-与ST6Gal1的3’UTR区域特异性结合。通过转染上调细胞miRNA-9的表达量,能够抑制ST6Gall及α-2,6连接唾液酸的表达水平,同时降低细胞增殖、迁移、侵袭、黏附能力,抑制与黏附能力密切相关的FAK信号通路：反之,ST6Gal1及α-2,6连接唾液酸的表达水平提高,细胞增殖、迁移、侵袭、黏附能力升高,FAK信号通路得到激活。以上结果提示：ST6Gal1是miRNA-9调控的靶基因之一。miRNA-9通过抑制小鼠肝癌细胞中ST6Gall和α-2,6连接唾液酸的表达,衰减FAK信号通路的激化,进而抑制其淋巴道转移能力。miRNA-9可能是肿瘤转移干预药物设计的靶点分子。