Gpc3基因在SD大鼠颅缝组织细胞中表达的研究

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背景与目的Gpc3基因可以结构性及功能性的调节细胞的增殖、分化及基因表达。目前的研究发现其在颅骨成骨及颅缝闭合过程中有着相当重要的作用。本次研究旨在GPC3基因在颅缝组织和细胞中不同时期的表达情况,为后续的疾病模型研究提供参照与对比。方法研究并观察1d、3d、7d的SD大鼠颅缝细胞组织,应用组织切片免疫荧光染色、RT-qPCR、western blotting等技术分别在基因、蛋白层次掌握其在不同年龄大鼠中的表达水平,并结合颅骨microCT扫描结果,判断其与颅骨成骨及颅缝闭合的关系。结果GPC3蛋白大鼠在未闭合颅缝组织不同阶段均有表达,组织切片免疫荧光显示在细胞内、细胞膜表面及细胞外基质中均有GPC3表达;RT-qPCR显示Gpc3基因表达随着大鼠年龄增长呈现下降趋势;western blotting结果显示在各期颅缝细胞中均检测到GPC3蛋白表达,且表达量随着年龄增长呈下降趋势;根据颅骨microCT扫描结果发现大鼠各颅缝在第14d均未闭合,但均呈现明显的缩窄趋势,SD大鼠颅骨的骨体积占总体积的比值随着年龄增大呈增大趋势。结论1)Gpc3基因在大鼠未闭合颅缝组织各时期均有表达且表达的水平随着颅缝闭合逐渐下降;2)GPC3蛋白可以被分泌到细胞外基质并且可能对颅骨成骨和颅缝闭合有着重要的作用。
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