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目的:喉癌是耳鼻咽喉-头颈外科常见的恶性肿瘤。受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinases, RTKs)是外界刺激信息传递至细胞核,转化成细胞效应的信号通路的关键组成部分,参与细胞生长、增殖、转化及胚胎发育和肿瘤形成,具有重要的生理功能。促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocyte receptor, Eph受体)是酪氨酸蛋白激酶受体家族中最大的分支。Eph配体名为Ephrin,Eph受体与Ephrin配体能调控细胞增殖、调控细胞间、细胞与细胞外基质的粘附作用;且Eph与血管生成拟态、肿瘤血管生成有关,EphA2在肿瘤细胞迁移中也有重要作用。本研究从蛋白水平探讨EphA2和EphrinA1、EphrinB1与喉癌发生发展的关系,试从分子生物学角度探讨喉癌的发病机制。方法:40例喉癌组织及40例癌旁组织(距肿瘤切缘至少0.5cm)取自2006年1月至2007年12月于河北医科大学第四医院耳鼻咽喉-头颈外科住院手术的喉癌患者,取15例非喉癌患者的喉部正常粘膜组织做对照。所有肿瘤组织均经病理学确诊为鳞状细胞癌,癌旁组织及喉部正常粘膜均经病理证实为炎症或正常粘膜。应用流式细胞术检测喉癌组织、癌旁组织及喉部正常粘膜组织的EphA2和EphrinA1、EphrinB1蛋白表达的含量。基因蛋白以荧光指数(FI)作为定量分析指标,以FI>1.0为阳性表达,FI≤1.0为阴性表达。应用统计软件SAS6.12 for windows进行数据分析,以P≤0.05为差异在统计学上有显著性意义,P≤0.01为差异在统计学上有非常显著性意义。结果:1 EphA2蛋白在喉癌组织中的表达量(FI=1.4877)和阳性表达率(77.5%)分别高于癌旁组织(1.2178,55%)和正常喉粘膜组织(0.9999,40%),(P<0.05) (χ2=4.528,P=0.033);(P<0.05) (χ2=5.369,P=0.021);癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义。在喉癌组织中,EphA2蛋白在淋巴结转移(N+)组的表达量(1.8264)和阳性表达率(100%)分别高于无淋巴结转移(N0)组(1.3592,69%),(P=0.002) (Fisher’s精确概率计算,P=0.043);临床Ⅲ、Ⅳ期组的表达量(1.6757)和阳性表达率(95.2%)分别高于临床Ⅰ、Ⅱ期组(1.2579,57.9%),(P=0.002) (Fisher’s精确概率计算,P=0.007);病理组织学G1、G2、G3组的表达量和阳性表达率分别为(1.3871,70%),(1.7675,100%),(1.8110,100%),G3组的表达量明显高于G1组(P<0.05),G1、G2组和G2、G3组的表达量差异无统计学意义,三组间阳性表达率差异无统计学意义。EphA2蛋白在不同临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别的表达量和阳性表达率差异均无统计学意义。2 EphrinA1蛋白在喉癌组织中的表达量(FI=1.4325)和阳性表达率(82.5%)分别高于癌旁组织(1.1949,57.5%)和正常喉粘膜组织(0.9999,46.7%),(P<0.05) (χ2=5.952,P=0.015);(P<0.05) (χ2=7.062,P=0.008);癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义。在喉癌组织中,EphrinA1蛋白在淋巴结转移(N+)组的表达量(1.7202)高于无淋巴结转移(N0)组(1.3232),阳性表达率(100%、75.9%)差异无统计学意义,(P=0.003) (Fisher’s精确概率计算,P=0.159);临床Ⅲ、Ⅳ期组的表达量(1.6097)和阳性表达率(95.2%)分别高于临床Ⅰ、Ⅱ期组(1.2159,68.4%),(P=0.001) (Fisher’s精确概率计算,P=0.040);病理组织学G1、G2、G3组的表达量和阳性表达率分别为(1.3353,76.7%),(1.6172,100%),(1.8308,100%),G3组的表达量明显高于G1组(P<0.05),G1、G2组和G2、G3组的表达量差异无统计学意义。三组间阳性表达率差异无统计学意义。EphrinA1蛋白在不同临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别的表达量和阳性表达率差异均无统计学意义。3 EphrinB1蛋白在喉癌组织中的表达量(FI=1.2308)和阳性表达率(80%)分别高于癌旁组织(1.0340,57.5%)和正常喉粘膜组织(1.0000,46.7%),(P<0.05) (χ2 =4.713,P=0.030);(P<0.05) (χ2=4.371,P=0.037);癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义。在喉癌组织中,EphrinB1蛋白在淋巴结转移(N+)组的表达量(1.3587)高于无淋巴结转移(N0)组(1.1823),阳性表达率(100%、72.4%)差异无统计学意义,(P=0.044) (Fisher’s精确概率计算,P=0.080);临床Ⅲ、Ⅳ期组的表达量(1.3132)和阳性表达率(95.2%)分别高于临床Ⅰ、Ⅱ期组(1.1302,63.2%),(P=0.019) (Fisher’s精确概率计算,P=0.017);病理组织学G1、G2、G3组的表达量和阳性表达率分别为(1.1644,80%),(1.2968,80%),(1.4552,80%),G3组的表达量明显高于G1组(P<0.05),G1、G2组和G2、G3组的表达量差异无统计学意义,三组间阳性表达率差异无统计学意义。EphrinB1蛋白在不同临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别的表达量和阳性表达率差异均无统计学意义。4喉癌组织中EphA2蛋白与EphrinA1蛋白、EphrinB1蛋白有多元线性回归关系,且均为正相关。EphrinA1蛋白、EphrinB1蛋白表达随着EphA2蛋白增大而增大,多元线性回归方程为Y=0.140+0.422X1+0.604X2(F=7.300 P=0.002)。结论:1 EphA2蛋白和EphrinA1、EphrinB1蛋白在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中均有表达。2 EphA2蛋白和EphrinA1、EphrinB1蛋白在喉癌组织中的定量及定性表达均明显高于癌旁组织及正常喉粘膜组织,癌旁组织及正常喉粘膜组织的表达差异无统计学意义。3 EphA2蛋白和EphrinA1、EphrinB1蛋白在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关。4 EphA2蛋白和EphrinA1、EphrinB1蛋白在喉癌组织中的表达有多元线性回归关系,且均为正相关,EphrinA1蛋白、EphrinB1蛋白表达随着EphA2蛋白表达的增大而增大。5 EphA2蛋白和EphrinA1、EphrinB1蛋白高表达可能与喉癌的发生、发展有关。