【摘 要】
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目的:血管生成分化潜能对BMP9诱导的组织工程骨至关重要。在本项研究中,我们阐明了lnc RNA H19在BMP9诱导的间充质干细胞（MSCs）成骨成血管分化中的潜在机制。材料和方法:在体外和体内均验证了BMP9诱导的MSCs的成骨和血管生成分化。使用重组腺病毒载体以过表达BMP9和沉默H19。PCR、Western-blot和免疫组织化学用于检测基因表达。流式细胞仪用于检测细胞表面标志物,磁珠分
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目的:血管生成分化潜能对BMP9诱导的组织工程骨至关重要。在本项研究中,我们阐明了lnc RNA H19在BMP9诱导的间充质干细胞（MSCs）成骨成血管分化中的潜在机制。材料和方法:在体外和体内均验证了BMP9诱导的MSCs的成骨和血管生成分化。使用重组腺病毒载体以过表达BMP9和沉默H19。PCR、Western-blot和免疫组织化学用于检测基因表达。流式细胞仪用于检测细胞表面标志物,磁珠分选用于进行细胞筛选。通过RIP分析证实H19和p53的结合,通过Chip分析鉴定p-p53和Notch1启动子区域的结合。结果:在体外实验中,我们发现H19在MSCs中高表达,沉默H19会减弱BMP9诱导的MSCs成骨和血管生成分化。同时,我们发现BMP9诱导的CD31+细胞对于BMP9诱导的骨形成是必不可少的,沉默H19会阻断BMP9诱导的CD31+细胞的生成。此外,在体内实验中,我们发现沉默H19会抑制BMP9介导的血管形成和骨形成,与体外实验结果一致。在机制上,我们阐明H19能够直接结合P53蛋白并促进P53磷酸化,磷酸化的P53会结合Notch1基因的启动子区域来增强Notch1表达,从而增强血管形成能力,同时促进成骨。结论:这些研究结果表明,H19通过促进磷酸化P53介导的Notch1表达来调节BMP9诱导的MSCs血管生成分化,促进成骨。
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