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葛根是一种常用的传统中药材,它是豆科植物野葛和粉葛的干燥根。葛根具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻的功效,多用于治疗高血压、肩部和关节僵硬、普通感冒、流行性感冒、心血管疾病、酗酒等病症。葛根中除含有约占19%~20%的淀粉外,主要成分为异黄酮类化合物以及少量的黄酮类物质,其中大豆甙、大豆甙元、葛根素是葛根的主要活性成分,尤其以葛根素的含量最高。葛根素被广泛地制成制剂,主要用于心血管疾病治疗,具有降血压、抗脂质过氧化、抗心律失常、保护心肌、影响血液流变学和血小板聚集等药理作用。葛根素的含量直接地影响葛根的疗效。定量葛根素可以达到质量控制的效果。 拉曼光谱是一种有效的鉴别和定量复杂物质的分析方法。它能提供每个物质的分子结构的指纹图谱,进行物质鉴定。同时,分析物的浓度和拉曼峰的强度相关,根据峰强可以求得物质浓度。拉曼光谱具有快速、简便、精细如指纹的分辨能力、对样品无损及不受水溶液干扰等优点。近年,拉曼光谱被广泛地应用于食品,药品和化学等领域的研究。 本文试用拉曼光谱定性和定量葛根中葛根素。拉曼光谱图清晰地提供了葛根素的分子指纹图谱,可以分析出葛根素的分子结构。拉曼的绝对峰强和分析物浓度表现出相关性。但是拉曼峰强容易受到激光强度和仪器等因素的影响,重现性较差,为了得到一种稳定的定量模型,需要用内外标法来校正。目前,当检测样品是溶液中的溶质时,溶剂可以被选择作为内标,因为溶剂基本不会影响分析物浓度。此实验中,乙醇被选作内标,因为它既能溶解葛根素又能从葛根中提取葛根素。使用10 mw波长514.5 nm氩离子激光器作为激发光源,激光光速通过Leica拉曼成像,显微镜用20倍物镜聚焦到样品上。结果显示,葛根素和乙醇特征峰强比率与葛根素的浓度具有良好的线性关系,线性方程为:y=5.83038x+4.0478E-4,R2=0.9993,检出限为2×10-4 mol/L。应用此定量模型也成功的检测出葛根中葛根素的含量。因此,拉曼光谱是一种快速可靠地检测葛根中葛根素的方法。