海带多糖对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤抑制作用的初步研究

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目的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是中国南方地区最常见的头颈部恶性肿瘤,主要治疗方法是以放射治疗为主辅以化学药物治疗的综合治疗,而化学药物治疗对中晚期的鼻咽癌患者尤为重要,但治疗剂量的化疗药物多有较多严重的毒副作用。海带多糖(Laminaria Japonica Polysaccharides,LJP)是从海带中分离提取出的具有生物活性的植物多糖,具有抗肿瘤、提高免疫功能、防辐射等多种活性功能,本研究旨在通过观察海带多糖在体内外对人鼻咽癌细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法运用MTT法检测不同浓度的海带多糖对人鼻咽癌细胞株(HONE1和CNE2)增殖的抑制作用。运用Annexin V-FITC/PI双染法检测海带多糖对HONE1细胞凋亡的影响。以人鼻咽癌细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分入5个处理组:生理盐水组、顺铂组、海带多糖低、中、高剂量组,每组6只,观察各组移植瘤体积和裸鼠体重的变化情况。2周治疗结束后,处死裸鼠,剖出瘤块,称瘤重并计算各组的抑瘤率,并在透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)观察移植瘤细胞超微结构的改变。结果MTT结果显示,海带多糖对鼻咽癌细胞(HONE1和CNE2)的增殖有抑制作用,且具有剂量相关性,320mg/L的海带多糖作用72h的抑制率分别为58.27%(P<0.01)和55.00%(P<0.01);流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)检测结果表明,海带多糖具有诱导HONE1细胞凋亡的作用,凋亡率随着海带多糖浓度的增加而增高,320mg/L的凋亡率为(49.51±1.89)%(P<0.01)。体内实验中,海带多糖中、高剂量组抑瘤率分别为33.7%(P<0.05)和47.0%(P<0.01),具有明显抑制移植瘤的作用,而低剂量组的抑瘤率仅为16.4%(P>0.05)。透射电镜结果提示移植瘤组织的癌细胞呈现凋亡独特的改变:细胞皱缩、染色质凝聚、胞核碎裂、胞浆空泡变性、胞膜起泡、形成游离的凋亡小体。结论海带多糖具有抑制鼻咽癌细胞生长的作用,机制可能是通过诱导癌细胞凋亡而实现的。
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