香蕉镰刀菌枯萎病生防菌的筛选及其根际定殖研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:lz261433
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由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporumf.sp.cubense,Foc)侵染而引起的香蕉枯萎病,己成为影响香蕉生长最为严重的真菌病害之一。而根际促生菌在改善作物生境、防治植物病害中表现出巨大的潜力,正成为当前研究的热点。本论文为探索应用根际促生菌防控香蕉枯萎病,首先运用平板对峙培养法,分别从韭菜和香蕉的根际土壤中分离出对镰刀菌有拮抗效果的菌株71株。进行细菌16s序列扩增并测序,经Blast比对后剔除重复菌株,分别筛选出对尖孢镰刀菌生理4号小种有明显拮抗作用的菌株3株,分别为来自于香蕉根际土壤的菌株M8解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefens)、来自于韭菜根际土壤的菌株C5枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和C14荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。进一步将筛选的3株菌株M8、C5、C14接种处理香蕉苗后,3株菌株不仅对香蕉生长有明显的促进效果,还能诱导提高香蕉抗病相关指标,增强香蕉抵抗香蕉枯萎病的能力。由此,初步认定三株菌株可作为香蕉根际促生菌,进行后续研究。具体研究结果如下:(1)与CK相比3株菌株能显著促进香蕉株高增高、假茎围增粗,并能促进香蕉叶片叶绿素相对含量增加,对香蕉生长有明显的促进效果;(2)菌株M8和C5接种处理能明显提高香蕉苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)等香蕉抗病相关酶活指标,增强香蕉对镰刀菌枯萎病的抗病能力;(3)对抗病相关基因进行荧光定量PCR发现,三种根际促生菌能诱导香蕉MaPR-2,MaPPO,MaMBL和MaPOD基因表达,增强香蕉抗病性;(4)对香蕉接种FOC后的感病指数分析显示,与未经促生菌诱导处理的对照(发病率43.4%)相比,接种促生菌能显著降低枯萎病发病率,C5处理后香蕉发病率为21.8%,M8处理后发病率为24.5%,C14处理后发病率为30.1%;(5)利用绝对定量PCR检测发现,与未种植香蕉的对照土相比,香蕉根际土壤中菌株M8、C5、C14的数量显著增加,表明三株菌株在香蕉根际可以定居、繁殖。最后,收集香蕉根系分泌物和残茬降解物处理三种促生菌,发现香蕉根系分泌物和残茬降解物均能明显促进M8、C5和C14的生长。进一步选出香蕉根系分泌物中代表性有机酸,分别外源添加处理3种促生菌发现:(1)苹果酸、水杨酸、阿魏酸和草莓酸能明显促进M8的生长,而对羟基苯甲酸对M8的作用效果不明显;(2)苹果酸能明显促进C5的生长,而水杨酸、阿魏酸、草莓酸和对羟基苯甲酸对C5的作用效果不明显;(3)苹果酸、水杨酸、阿魏酸、草莓酸和对羟基苯甲酸均能促进C14的生长。本研究最终筛选到了 3株能在香蕉根际定殖并能增强香蕉抗镰刀菌枯萎病的根际促生菌;另外,还从根系分泌物的角度对3种菌株的定殖因素进行了分析。本研究不仅为生态防控香蕉枯萎病提供菌株借鉴,也为探索生防菌在田间的有效定殖研究提供思路和参考。
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