黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢的影响及其交互作用

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目的:考察黄芪葛根汤及其中黄芪、葛根配伍对糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢的影响,阐释黄芪、葛根在调节糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢过程中的交互作用。材料与方法:将86只SD雄性大鼠根据血糖因素随机分成6组,除正常组11之外,其余每组15只,分别为(1)正常组、(2)模型组、(3)中药对照组(金芪降糖片)、(4)黄芪组、(5)葛根组,(6)黄芪葛根汤组。按46mg·kg-1体重剂量给SD大鼠一次性腹腔注射STZ诱导糖尿病模型,除正常组、阳性对照组外,其余各组按2×2析因设计实施实验。中药对照组按1.47g·kg-1体重剂量灌胃,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组分别按2.7、1.35、4.05g·kg-1剂量灌胃。治疗30d测定随机血糖;生化分析仪检测血清胆固醇(CHO),甘油三酯(TG);酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测肝组织白介素-12(IL-12)、白介素-15(IL-15)、脂联素(ADPN)、葡萄糖转运体4(GLUT4)、胰岛素(INS)、瘦素(LEP)水平;RT-PCR法检测肝脏脂联素受体2(Adipo R2)和过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα);Westernblotting法检测肝脏Adipo R2和PPARα的蛋白表达。实验数据分析采用SPSS统计软件。结果:1黄芪葛根汤对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响1.1对血糖的影响造模前各组大鼠血糖差异无统计学意义。造模后模型组血糖明显升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。第30d,与正常组比较,模型组血糖水平升高显著;与模型组比较,黄芪组、葛根组、黄芪葛根组血糖水平降低明显(P<0.05)。单味药物组间比较:黄芪、葛根均有降低大鼠血糖作用,黄芪与葛根的作用效果不同,葛根作用效果较佳。1.2对血脂的影响模型组大鼠血清CHO、TG较正常组明显升高,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各给药组血清CHO水平明显降低(P<0.05);各给药组(除黄芪葛根汤组外)血清TG水平下降明显(P<0.05)。单味药物组间比较:对血清CHO、TG单一指标影响:黄芪、葛根组与模型组均有明显差异,黄芪与葛根的作用效果相同。主效应及药物间交互作用分析:黄芪、葛根对血清CHO的影响无交互作用,而对血清TG的影响则有交互作用,合用比单一用药效果好。2黄芪葛根汤对糖尿病大鼠肝脏ADPN、GLUT4、INS、LEP的影响模型组大鼠肝脏ADPN、GLUT4、INS、LEP均明显下降,与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。单味药物组间比较:(1)对ADPN影响:黄芪、葛根组与模型组均没有明显差异;(2)对GLUT4影响:黄芪组与模型组有明显差异,葛根的作用不明显;(3)对胰岛素INS影响:黄芪组与模型组有明显差异,葛根的作用不明显;(4)对LEP影响:黄芪、葛根组与模型组均有明显差异,黄芪与葛根的作用效果不同,黄芪作用较好。主效应及药物间交互作用分析:(1)对ADPN作用:黄芪、葛根对脂联素ADPN均没有影响,两药之间也没有交互作用;(2)对GLUT4作用:黄芪能有效提升GLUT4水平,葛根作用不明显,两药之间交互作用无统计学意义;(3)对INS作用:黄芪能有效提升INS水平,葛根作用不明显,两药之间交互作用无统计学意义;(4)对LEP作用:黄芪、葛根均能有效提升LEP水平,两药之间有交互作用,合用比单一用药效果好。3黄芪葛根汤对糖尿病大鼠对肝脏IL-12、IL-15的影响模型组大鼠肝脏IL-12、IL-15均明显升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组肝脏IL-12水平明显下降(P<0.05);各给药组肝脏IL-15水平明显降低(P<0.05)。单味药物组间比较:(1)对IL-12影响:黄芪、葛根组与模型组差异有统计学意义,黄芪与葛根的作用效果相同;(2)对IL-15影响:黄芪、葛根组与模型组差异有统计学意义,黄芪与葛根的作用效果不同,黄芪作用较好;(3)对IL-12、IL-15综合指标影响:黄芪、葛根组与模型组均有明显差异,黄芪与葛根的作用效果不同,黄芪作用佳。药物间交互作用分析:(1)对IL-12作用:黄芪能有效降低IL-12水平,葛根作用不明显,两药之间有交互作用,合用效果不如单用黄芪;(2)对IL-15作用:黄芪、葛根均能有效降低IL-15水平,两药之间有交互作用,合用比单一用药效果好。4黄芪葛根汤对糖尿病大鼠肝脏Adipo R2、PPARαmRNA及蛋白表达的影响与正常组比较,模型组大鼠Adipo R2、PPARα基因表达水平显著降低,有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,黄芪葛根组大鼠肝脏Adipo R2mRNA表达水平上调,有统计学意义(P<0.01);黄芪组、葛根组、黄芪葛根组大鼠肝脏PPARαmRNA表达水平均上调,有统计学意义(P<0.05)。与中药对照组比较,葛根组、黄芪葛根汤组可上调Adipo R2基因表达水平(P<0.05);在上调PPARα基因表达上,各给药组无统计学差异。与正常组比较,模型组大鼠肝脏Adipo R2和PPARα蛋白表达水平显著下降,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏Adipo R2、PPARα蛋白表达水平升高,有统计学意义(P<0.05)。与中药对照组比较,葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏Adipo R2蛋白表达水平上调(P<0.05);在上调PPARα蛋白表达上,各给药组水平上无明显差异。结论:1.葛根降低糖尿病大鼠血糖水平优于黄芪,二药未呈现药效叠加,且无交互作用。2.黄芪、葛根降低糖尿病大鼠血清TG、CHO的效应强度相同,在下调血清甘油三酯过程中二药存在交互作用,合用优于单一用药。3.黄芪降低糖尿病大鼠肝组织LEP、IL-15水平的作用优于葛根,并具有交互作用,合用优于单一用药。4.黄芪、葛根配伍降低糖尿病大鼠血糖、血脂水平,其机制可能与其调节脂联素/Adipo R2/PPARα信号转导有关。
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