“四时五脏阴阳”理论是在“天人相应”思想指导下形成的藏象研究的命题,该理论指出人体是以五脏为中心的外应四时阴阳、内合六腑、五官、五体、五华等组织器官的五大功能系统组成的有机整体。心、肝、脾、肺、肾各脏系统分别与四时相应,主导着相应季节时令中五脏系统之间的协调与控制,维持着人体生命活动。本课题组在程士德教授和郭霞珍教授指导下,进行了深入的探讨,并结合松果腺、褪黑素等现代科学成果,展开了一系列文献与实验研究,取得了阶段性成果。鉴于动物实验研究的局限性,拟开展季节气候对人体生理病理影响的文献与实验研究,为“四时五脏阴阳”理论研究成果与临床结合开拓思路。 1 目的与方法 运用文献学方法,分析中医理论中最能体现季节气候对人体生理病理影响的五运六气学说为研究切入点。五运六气学说是《内经》运用天人相应理论的典范,其把自然现象与生物的生命现象统一起来,把自然气候变化和人体发病规律统一起来,从宇宙的节律上探讨了气候变化对人体健康与疾病发生的对应关系。因而,运用运气学说研究季节气候对人体生理病理影响很有意义。由于在 SARS 诊疗过程中,中医运气学说发挥了重要作用,运气学说已成为当前研究的热点。但是运气学说理论艰深,历代学者对其科学性评说不一,故而,梳理古代五运六气学专著和相关著作运气部分的著述阐明其科学内涵,是首先开展的基本工作。“四时五脏阴阳”课题组在“肾应冬”的研究中最为深入,为了展开以人作为对象的研究,克服动物实验研究的局限性,因而,我们结合运气学说和医学气象学有关内容,从分析冬季气象入手,探讨季节气候对人体生理病理的影响,为“四时五脏阴阳”理论研究成果与临床结合开拓思路。 有关“四时五脏阴阳”理论的动物实验研究居多,而以人作为研究对象的研究较少且薄弱,由于实验动物大鼠或小鼠具夜行性,昼伏夜出,与人的生活习性不同,因而,在动物体上观测到的褪黑素节律变化的研究结果尚不能最终确定它是人体“天人相应”的物质基础。虽然有文献报道人体褪黑素夏低冬高的节律改变,但未见在节气的“四立、二分、二至”(立春、春分、立夏、夏至、立秋、秋分、立冬、冬至)等时间点人体褪黑素含量变化的报道,在这些特殊的时间点,人体脏腑功能的反映形式是不同的。本课题组前期工作在“肾应冬”、“肝应春”、“肺应秋”的实验中,主要进行了“冬至”与“夏至”、“秋分”与“春分”的有关褪黑素的对比研究,尚未涉及“四立、二分、二至”多个节气间的比较研究,如果将动物体上观测到的褪黑素节律变化与人体研究结合起来,将进一步推动本研究方向的深化,因而我们选择“四立、二分、二至”等多个节气测定正常人血清、唾液褪黑素含量的变化,观察天时节气变化对人体生理的影响。 实验研究中,褪黑素的准确、快速、大样本的检测是必须的。可同时定量检测褪黑素及其相关吲哚化合物的主要方法是气相色谱-质谱联检(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)和放射免疫测定(RIA)。GC-MS 是最受欢迎的用于确证其他方法可靠2 季节气候对人体生理病理影响的文献与实验研究性的技术,HPLC 最大的优点在于对同一样品中极其相似的吲哚化合物也能分离测定。但同 GC-MS 一样,HPLC 系统造价高,维修费用大,而且不易稳定的进行大批量检测,而放射免疫分析法(RIA)在大量分析样品时成为最佳选择。目前,褪黑素检测试剂盒主要由 CIDtech Research Inc.(加拿大)、Buhlmann Laboratories(瑞士)、America Laboratory Products Company(ALPO,美国)以及 IBL 公司(德国)等提供出售,而国内在褪黑素的检测方面主要应用高效液相色谱分析法与反向高效液相法,多用于检测褪黑素制剂中褪黑素的含量,并用于质量控制检测,其灵敏度较低;而在人血清检测方面主要购买国外褪黑素放免或酶联检测试剂盒(主要购自德国 IBL 公司生产的检测试剂盒)。鉴于国外试剂盒昂贵,国内尚无褪黑素放免测定试剂盒,在课题组的研究中,需要测定褪黑素含量,因而我们联合海军总医院放免实验中心开发了褪黑素放免测定试剂盒。在试剂盒组分中,褪黑素抗血清的制备是解决试剂盒长期稳定使用的关键,我们也进行了褪黑素抗血清的制备。由于血液取材不便,我们又摸索了唾液中褪黑素含量的变化,以期以唾液样品取代血清样品进行测定。2.结果2.1 文献研究2.1.1 在对古代运气学专著与相关著作运气部分叙录的基础上,分析研究了对运气学说所持有的不同观点,从而肯定了其科学价值。2.1.2 运气学说是科学假说,换言之,运气学说是在实践基础上产生的,但还不是经过实践充分验证的科学理论,它的提出是一种假说的形成。运气学说具有推测性、科学性和可变性三大特点。其在医学上的运用,主要是推测每年气候变化和疾病流行的大致情况,为预防疾病及临床诊断、治疗提供重要参考。2.1.3 运气学说对季节气候影响人体的预测性研究,是运用其切入的方式。因此,运用运气学说预测疫病的流行与治疗具有一定的研究价值。2.1.4 运气学说中有关气象的描述还十分简约,难以掌握应用,因而梳理运气学说中的气象内容,采用现代气象学方法及多学科、多手段是研究运气学说的医学气象学内涵的必由之路。而选择从一个?