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菥蓂（Thlaspi arvense L.）又名苦芥子、遏蓝菜,是双子叶植物十字花科菥蓂的全草。根据民间记载,菥蓂具有清肝、明目、利尿等作用,可用于治疗肾炎和子宫内膜炎,并且菥蓂在我国分布广泛,资源蕴藏量非常巨大。因此本文以菥蓂为研究对象,初步筛选菥蓂具有抗炎活性的有效部位,并确定给药剂量与抗炎活性的量效关系,经过水提醇沉、萃取、大孔树脂吸附等一系列纯化手段后,得到菥蓂不同部位的提取物,并将菥蓂提取物与菥蓂中所含有的黄酮类化合物单体进行了体外抗炎的活性对比与研究。从而为菥蓂的开发利用提供实验依据,为新的抗炎中药的研发与应用提供了理论支持。1.菥蓂抗炎活性部位筛选通过设计水提取法和70%乙醇提取法两种不同提取路线,以二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和角叉菜胶致小鼠足肿胀实验为模型,以地塞米松和阿司匹林为阳性对照,考察菥蓂水提物和醇提物对模型的影响,以初步筛选菥蓂抗炎的有效活性部位,并确定菥蓂水提浸膏给药剂量与抗炎活性的量效关系。实验结果显示,菥蓂水提浸膏和醇提浸膏均对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显抑制作用,且水提浸膏抑制耳肿胀的效果优于醇提浸膏,但两种浸膏的抗炎活性均小于地塞米松;菥蓂水提浸膏对角叉菜胶致小鼠足肿胀也有一定的抑制作用,醇提浸膏则无明显抑制足肿胀的作用。说明菥蓂水提浸膏具有更广泛的抗炎活性。当菥蓂水提浸膏给药剂量为400 mg·kg-1时,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制效果最佳,平均耳廓肿胀抑制率为55%;当菥蓂水提浸膏给药剂量为800 mg·kg-1时,对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的抑制作用最佳,肿胀抑制率为30.39%。2.菥蓂水提物及8种黄酮类成分的体外抗炎活性研究将菥蓂水提物经过醇沉、正丁醇萃取、D101大孔树脂吸附等一系列纯化后,分别制得菥蓂水提醇沉浸膏、正丁醇部位以及菥蓂大孔树脂富集部位。采用LPS诱导小鼠RAW264.7细胞产生炎性反应,实验结果表明1μg·m L-1的LPS对RAW264.7细胞诱导32 h时,建立了最佳的体外炎症模型。将上述菥蓂提取物与黄酮类化合物荭草苷、异荭草苷、大波斯菊苷、牧荆苷、芹菜素、木犀草素、异牧荆苷、木犀草苷的体外抗炎活性相比较,以确定菥蓂抗炎的有效活性物质。首先采用MTS法确定受试药的安全剂量范围,实验结果表明:荭草苷浓度在12.5-400μmol·m L-1、异荭草苷浓度在12.5-200μmol·m L-1、牧荆苷浓度在12.5-400μmol·m L-1、异牧荆苷浓度在12.5-400μmol·m L-1、木犀草苷浓度在6.25-12.5μmol·m L-1、木犀草素浓度在6.25-25μmol·m L-1、芹菜素浓度在6.25-25μmol·m L-1、大波斯菊苷浓度在6.25-400μmol·m L-1、水提醇沉浸膏浓度在7.8125-1000μg·m L-1、正丁醇部位浓度在7.8125-500μg·m L-1、大孔树脂富集部位浓度在7.8125-500μg·m L-1时,药物对RAW264.7细胞是没有明显毒性的。因此在后续研究中,采用上述药物的安全剂量范围,以确保药效的真实有效。当使用浓度为200-400μmol·m L-1的荭草苷、6.25-25μmol·m L-1的木犀草苷、6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草素、6.25-25μmol·m L-1的芹菜素、6.25-400μmol·m L-1的大波斯菊苷、125-1000μg·m L-1的水提醇沉浸膏、62.5-500μg·m L-1的正丁醇部位,62.5-500μg·m L-1的大孔树脂富集部位处理LPS诱导的RAW264.7细胞后,释放的NO浓度与模型组相比均有显著差异性或极显著差异性（P<0.05或P<0.01）,说明上述药物在一定浓度范围内能够有效的抑制RAW264.7细胞的NO释放,且荭草苷、芹菜素、大波斯菊苷和菥蓂大孔树脂富集部位对NO的分泌呈现出剂量依赖性抑制。小鼠RAW264.7细胞经过LPS诱导后,炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌量与空白组相比均极显著增多,而经过6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草素、6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草苷、6.25-12.5μmol·m L-1的芹菜素、12.5-50μmol·m L-1的大波斯菊苷、62.5-250μg·m L-1水提醇沉浸膏、62.5-250μg·m L-1的正丁醇部位、125-250μg·m L-1的大孔树脂富集部位处理后,受试药组与模型组相比均能显著或极显著的抑制TNF-α的分泌且呈现出剂量依赖性抑制;经过6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草素、6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草苷、6.25-12.5μmol·m L-1的芹菜素、50μmol·m L-1的大波斯菊苷、62.5-125μg·m L-1的水提醇沉浸膏、62.5-250μg·m L-1的正丁醇部位、125-250μg·m L-1的大孔树脂富集部位处理后,与模型组相比均能显著或极显著的抑制IL-6的分泌水平;经过6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草素、6.25-12.5μmol·m L-1的木犀草苷、6.25-12.5μmol·m L-1的芹菜素、25-50μmol·m L-1的大波斯菊苷、62.5-125μg·m L-1的水提醇沉浸膏、62.5-250μg·m L-1的正丁醇部位、125-250μg·m L-1的大孔树脂富集部位处理后,与模型组相比均能极显著的抑制IL-1β的分泌,且呈现出剂量依赖性抑制。上述药物对TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌在不同程度上得到了抑制,炎性反应强度有一定减弱,表现出一定抗炎药理活性。