【摘 要】
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氯酚类化合物(CPs)具有生物毒性、生物累积性、化学稳定性及难生物降解等特性,在环境中广泛存在并易通过食物链在生物体内累积,如得不到有效处理,将严重危害人类健康及生态安
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氯酚类化合物(CPs)具有生物毒性、生物累积性、化学稳定性及难生物降解等特性,在环境中广泛存在并易通过食物链在生物体内累积,如得不到有效处理,将严重危害人类健康及生态安全。酶解法在处理难降解有机废水过程中操作简单、安全高效,为氯酚类污染物的处理提供了新思路。针对上述问题,本论文以细菌纤维素(BC)作为漆酶固定基材,优化制备BC固定漆酶环境治理材料(BC/Laccase),研究BC/Laccase的表面形貌、化学结构、稳定性及酶学特性;并在漆酶/介体系统(LMS)中探究BC/Laccase对氯酚类污染物的处理能力,主要开展工作如下:1.BC和BC/Laccase优化制备及其性能表征通过调控发酵条件和选择培养方式,得到高漆酶负载率的BC基材;通过优化固定工艺,制备了环境友好、安全高效的BC/Laccase,结果表明:BC基材最佳培养条件为溶液pH 5、培养温度28℃、培养时间8 d、接种量10.0%,产率可达0.538 g/L。采用吸附-交联法、交联法、氧化法三种固定方式,经优化获得最优固定工艺,确定其对应BC/Laccase的酶活分别为89.87 U/g、78.65 U/g、55.77 U/g。经米氏方程计算游离漆酶的Km值为1.018 mM,吸附-交联法、交联法、氧化法BC/Laccase的Km值分别为1.086 mM、1.795 mM、3.159mM。鉴于吸附-交联法制备条件温和、对酶分子影响较小,酶活力最高,米氏常数最小,并具有良好的储存稳定性和循环使用能力,最终确定以吸附-交联法固定方式构建BC/Laccase。2.BC/Laccase降解氯酚类污染物性能研究以2-氯苯酚和4-氯苯酚作为模拟氯酚类污染物,研究了 LMS中吸附-交联法BC/Laccase对氯酚类污染物的降解能力,结果表明:当介体为芥子酸时,吸附-交联法BC/Laccase对2-氯苯酚和4-氯苯酚的降解效率最高。经实验证明BC/Laccase对2-氯苯酚和4-氯苯酚的优化降解条件相同,均为介体用量4 mM、温度30℃、pH3、时间5 h。此时在没有介体(WLMS)条件BC/Laccase对2-氯苯酚的降解率为55.9%,而在LMS条件BC/Laccase对2-氯苯酚的降解率可达79.9%。在WLMS条件BC/Laccase对4-氯苯酚的降解率为53.7%,而在LMS条件BC/Laccase对4-氯苯酚的降解率可达78.2%。经过6次循环操作后,BC/Laccase对2-氯苯酚的降解率为84.4%,对4-氯苯酚的降解率为83.0%,表现出良好的循环使用性能。
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