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目的：研究褪黑素(Melatonin, Mel)联合DDP. MTX对骨肉瘤SaOS-2细胞增殖的影响,探讨Mel与DDP、MTX的抗肿瘤效应是否协同,为临床使用褪黑素辅助治疗骨肉瘤提供理论支持。方法：将褪黑素、顺铂、甲氨蝶呤单独或褪黑素与顺铂、甲氨蝶呤联合作用于SaOS-2细胞一定时间后,(1)应用cell counting kit-8试剂盒检测各组药物对细胞活性的影响,Compusyn软件分析合并用药效应(Combination index, CI), CI小于1提示为协同效应,CI等于1为叠加效应,CI大于1为拮抗效应；流式细胞学技术分别分析(2)各组细胞的周期分布比例以及(3)各组细胞的凋亡率。SPSS 20.0统计软件分析数据,组间比较用单因素方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果：(1)Mel (0.5、1、2、4、5mmol/L). DDP (6.67、16.67、33.33、 66.66 umol/L)、MTX (0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)单独作用于SaOS-2细胞48小时后,各实验组的细胞活性与对照组相比均下降(P<0.05),且药物的作用效应与剂量和时间相关；Mel (1 mmol/L) 与 DDP (6.67、16.67、 33.33、66.66 umol/L)联用于SaOS-2细胞48h后,与单用DDP相比,细胞活性均下降(P<0.05),但Mel与较低浓度DDP (6.67、16.67、33.33 umol/L)联用时Compusyn软件分析结果呈拮抗效应(CI>1),而和较高浓度DDP(66.66 umol/L)联用时呈协同效应(CI<1)；Mel (1 mmol/L)与MTX(0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)联用时细胞活性下降(P<0.05),且较单用MTX时更明显,Compusyn软件分析结果呈协同效应(CI<1)。(2) Mel(1 mmol/L)组和Mel (1 mmol/L)+MTX (0.5 mmol/L)组作用于SaOS-2细胞48h后,G1期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05), MTX (0.5 mmol/L)组的S期细胞比例较对照组明显增多(P<0.05)。DDP (16.67 umol/L)组与Mel (1 mmol/L)+DDP (16.67 umol/L)组各期细胞比例与对照组相比无明显差异(P>0.05)。(3)Mel(1 mmol/L)、 DDP (16.67 umol/L)、MTX (0.5 mmol/L)、Mel (1 mmol/L)+DDP (16.67 umol/L)和Mel (1 mmol/L)+MTX (0.5 mmol/L)组均能诱导细胞凋亡(P<0.05),且Mel (1 mmol/L)+DDP (16.67 umol/L)和Mel (1 mmol/L) +MTX (0.5 mmol/L)的合用组的细胞凋亡率较单药组的明显增加(P<0.05)。结论：Mel在体外抑制骨肉瘤SaOS-2细胞的活性,阻滞细胞周期于G1期,诱导细胞凋亡,有单独抗肿瘤效应,当与较低浓度的DDP联合应用时呈拮抗效应,而与MTX和较高浓度的DDP合用时呈协同抗肿瘤效应。