目的:铁摄入系统是肺炎克雷伯菌一种重要的毒力因子,其转录受到菌体的严格调控。铁摄取调节蛋白(Fur)是一种铁响应转录调控子,维持铁稳态;而Rcs调控系统可以调控胞外多糖的合成。目前已知铁摄入系统主要受Fur调控,但关于RcsAB影响铁摄入系统的研究知之甚少。肠菌素作为一种铁载体属于细菌的铁摄入系统。entC编码的异分支酸酶参与肠菌素的合成。通过生物信息学预测,在entC启动子区域可能存在RcsAB和Fur的结合基序。本课题旨在探究肺炎克雷伯菌NTUH-K2044转录调控子RcsAB和Fur对entC基因转录调控的分子机制。方法:CAS实验探究肺炎克雷伯菌NTUH-K2044和Kp:ΔrcsA、Kp:ΔrcsB、Kp:ΔrcsAB及其相应回补株的铁载体含量;用lacZ报告基因融合实验测定在不同铁含量的条件下entC基因启动子的转录活性;在缺铁条件下通过lacZ报告基因融合实验、RT-qPCR、EMSA和DNaseΙ足迹实验分析RcsAB对entC基因转录的调控。利用自杀质粒pKO3-Km通过同源重组无痕敲除fur基因;在铁充足条件下通过RT-qPCR、EMSA和DNaseΙ足迹实验验分析Fur对entC和rcsA基因转录的调控。结果:CAS实验表明RcsAB通过调控entC基因转录影响铁摄入系统;lacZ报告基因融合实验发现缺铁条件下entC启动子的活性被激活,而且entC转录受到RcsAB的正调控;RT-qPCR实验表明entC转录分别在缺铁条件下受RcsAB正调控,在铁充足条件下受Fur负调控,此外在铁充足的条件下rcsA转录受Fur抑制;EMSA实验表明转录调控子RcsAB复合物和Fur能与entC的启动子结合,Fur还可以与rcsA启动子结合;DNaseΙ足迹实验显示RcsAB和Fur在entC启动子的结合序列。结论:转录调控子RcsAB和Fur分别在铁缺乏和铁充足的条件下直接调控entC的转录;Fur还可以在铁充足的条件下通过抑制rcsA表达进而影响RcsAB合成,对entC的转录实现间接调控,存在级联调控关系。NTUH-K2044转录调控子RcsAB和Fur共调控entC转录进而影响铁摄入系统表达以响应环境中铁含量。