牛巴贝斯虫流行病学初步调查及体外培养研究

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巴贝斯虫病(Babesiosis)原被称焦虫病或血孢子虫病,是蜱传播的一类人畜共患血液原虫病的总称。而牛巴贝斯虫病(Babesiosis bovum)是世界各国公认的危害养牛业最重要的寄生虫病之一。1980年,Levy和Ristic建立了微气静相培养技术,实现了牛巴贝斯虫体外连续培养并得到了理想的效果。之后,该方法被迅速应用于双芽巴贝斯虫、犬巴贝斯虫、马巴贝斯虫等多种巴贝斯虫的体外培养均获得成功。目前,该方法被研究者用于巴贝斯虫病的病原分离和检测、免疫诊断、免疫监控、抗原成分分析、药物筛选、虫种保存等。因此,该技术被誉为巴贝斯虫研究史上的里程碑。新疆本地的牛巴贝斯虫能否进行体外培养尚未研究,本研究旨在尝试和摸索牛巴贝斯虫体外培养的方法和条件,并对其流行病学做一初步调查。本研究工作主要包括以下三部分:1克拉玛依地区牛梨形虫病流行病学调查传播牛梨形虫病的蜱有三种:全沟硬蜱、璃眼硬蜱和草原革蜱。本病多为混合感染,有明显的季节性。发病季节从5月份开始,6月中旬达到高峰,7月中旬后基本无发病,9月份有一次发病高峰,之后便再无发病。2牛巴贝斯虫PCR检测本试验通过PCR方法检测出牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫的混合感染,并从样本中筛选出牛巴贝斯虫单一感染的样本进行体外培养的研究。3牛巴贝斯虫体外培养研究试验结果表明,新鲜血液中的虫体在含40%牛血清的完全培养液和37℃、5%CO2的条件下能建立起牛巴贝斯虫的体外培养,虫体可以连续培养14天,传代13次,最高染虫率可以达到12.5%,平均染虫率为4%。对牛巴贝斯虫体外培养的几种影响因素进行比较,结果表明:培养液的pH值明显影响虫体的生长繁殖,最适体外培养的pH为7.0~7.2;合适的血清浓度是40%;灭活血清支持牛巴贝斯虫生长的能力较未灭活血清低;脱纤血清与自然凝固的血清用于培养的效果相同;RPMI-1640和M-199培养液支持牛巴贝斯虫生长的能力无明显差异。
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