【摘 要】
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新城疫（ND）是对养禽业危害最大的病毒性传染病之一,而新城疫病毒（NDV）F48E8株则是中国的标准强毒.为了研制有效ND基因工程疫苗,该实验构建了表达NDVFh8E8株融合蛋白（F蛋白）基因的重组鸡痘病毒（rFPV）,并测定了rFPV的免疫效力,为NDV基因工程苗今后的开发提供了试验基础.现将该实验所做的工作从两个方面概述如下：1.从含有NDVF F48E8基因的质粒PE1／E2-3,运用PCR
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新城疫（ND）是对养禽业危害最大的病毒性传染病之一,而新城疫病毒（NDV）F48E8株则是中国的标准强毒.为了研制有效ND基因工程疫苗,该实验构建了表达NDVFh8E8株融合蛋白（F蛋白）基因的重组鸡痘病毒（rFPV）,并测定了rFPV的免疫效力,为NDV基因工程苗今后的开发提供了试验基础.现将该实验所做的工作从两个方面概述如下：1.从含有NDVF F48E8基因的质粒PE1／E2-3,运用PCR法扩增的F基因,并将基因定向克隆到转移载体pEFgptl2S的Ecogpt基因下游,构建成转移载体pEF-2.以磷酸钙转染的方法转染含有下基因的重组鸡痘病毒rFPVNDF感染的鸡胚成纤维细胞,经有限稀释法挑取病毒蚀斑,;利用MXHAT培养基而进行负性筛选,得到了稳定生长新的重组鸡痘病毒rFPV-2.2.评价了重组毒rFPV - 2、rFPVNDF的免疫效力.在用SPF鸡进行的一次免疫效力试验中,9日龄的试验鸡接种rFPV -2和rFpvNDF后,能产生对大剂量NDV强毒的保护,保护率分别为50﹪和43﹪.将rFPV-2和Lasota结合使用保护率和疫苗对照组Lasota相同.从接种rFPV-2和rFPVNDF的试验鸡中检测出了中和抗体.在用用SPF鸡进行的二次免疫效力试验中rFPV-2和rFPVNDF产生的保护率为79吭和64﹪,而rFPV-2和Lasota结合使用保护率超过了对照组Lasota,达到了100﹪.
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