【摘 要】
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目的:建立准确、特异、快速的实验诊断风疹病毒宫内感染方法.方法:1、建立特异的RT-PCR法,用风疹病毒、脊髓灰质炎病毒、流行性腮腺炎、水痘病毒、甲型肝炎等病毒进行方法特
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目的:建立准确、特异、快速的实验诊断风疹病毒宫内感染方法.方法:1、建立特异的RT-PCR法,用风疹病毒、脊髓灰质炎病毒、流行性腮腺炎、水痘病毒、甲型肝炎等病毒进行方法特异性测定,用稀释疫苗株病毒做灵敏度检测.2、建立培养RT-PCR法,将疫苗株病毒稀释后接种Vero细胞培养,在不同时段收集培养上清液和细胞,RT-PCR法检测风疹病毒RNA.3、将稀释的风疹疫苗病毒加入到羊水中制备模拟标本,用建立的RT-PCR和培养RT-PCR检测.4、观察Vero细胞培养法出现细胞病变时间,每天观察细胞病变到28天.5、调查温州市孕妇对风疹病毒的免疫状况,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇血清中风疹病毒特异性IgG抗体和IgM抗体,筛选怀疑有风疹病毒宫内感染孕妇及胎儿.6、跟踪检测怀疑有风疹病毒宫内感染孕妇,对新生儿或引产胎儿脐带血进行特异性IgM抗体检测.7、对高度怀疑为风疹病毒宫内感染孕妇所产死胎、引产胎儿的各种组织脏器进行组织切片观察和电子显微镜检查.8、RT-PCR法和培养RT-PCR检测死胎、引产胎儿的心、肝、脑等组织和羊水.结论:1、RT-PCR法是一个快速、特异、灵敏的实验诊断风疹病毒感染的方法.可用于羊水中病毒含量在15TCID<,50>/ml及以上的风疹病毒宫内感染诊断.2、培养RT-PCR法是一个较直接RT-PCR法更准确和灵敏以及较培养法快速的实验诊断风疹病毒宫内感染的方法,尤其对于病毒含量低的标本是一个快速、准确和灵敏度方法.3、直接Vero细胞培养法分离需要时间较长,易污染且临床标本中的病毒可不出现细胞病变,单独细胞培养不适合用于诊断风疹病毒宫内感染.4、ELISA法适用于监测孕妇风疹感染状态,筛选可疑风疹病毒宫内感染.5、对怀疑有风疹病毒感染孕妇抽取羊水同时进行RT-PCR法和培养RT-PCR法检测,可能是一个较好的诊断宫内风疹病毒感染的方法.
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