论文部分内容阅读
目的:观察穴位埋线、穴位艾灸及两者联合干预对溃疡性结肠炎（UC）大鼠结肠黏膜组织形态学、结肠黏膜Notch 1受体、靶基因Hes 1及Math 1 m RNA和蛋白表达的影响,探讨穴位埋线、穴位艾灸及两者联合治疗UC的作用,并从Notch信号通路角度探讨其可能的作用机制。方法:从32只SD大鼠中随机抽取6只为正常组,其余大鼠采用5%三硝基苯磺酸+50%乙醇混合溶液灌肠法进行UC模型制备,成模大鼠随机分成模型组、埋线+艾灸组、埋线组、艾灸组,每组6只。分组次日开始治疗,穴位选取“上巨虚”“天枢”“大肠俞”。艾灸组:自制小艾条温和灸10 min,每日一次,共14次。埋线组:采用简易埋线针进行穴位埋线,每周1次,共2次。埋线联合艾灸组:先艾灸干预,6 h后埋线,方法疗程同艾灸组、埋线组。观测疾病活动指数（DAI）;光学显微镜观察HE染色下的结肠黏膜组织形态学变化;q PCR法检测结肠黏膜组织Notch 1、Hes 1和Math 1 m RNA的表达;Western blot法检测结肠黏膜组织Notch1、Hes 1和Math 1蛋白的表达。结果:1.一般状态及DAI正常组大鼠精神状况良好,毛发光泽、饮食饮水正常,大便呈颗粒状,肛周无异常分泌物;模型组大鼠精神萎靡、懒动,毛色萎黄、饮食饮水明显减少,大便稀不成形,或伴有黏液脓血便,肛周污秽,体形消瘦,DAI明显高于正常组（P<0.01）;穴位埋线组、艾灸组及埋线联合艾灸组大鼠症状均有不同程度改善、DAI不同程度降低（P<0.05或P<0.01）,其中埋线联合艾灸组明显低于埋线组和艾灸组（P<0.01）。2.结肠黏膜组织形态学变化正常组大鼠结肠黏膜上皮结构完整、清晰,杯状细胞丰富,腺管结构正常、排列整齐;模型组大鼠结肠黏膜上皮结构模糊、可见上皮大量破损、脱落,杯状细胞减少,腺体破坏,黏膜层大量炎性细胞浸润,充血水肿;埋线组、艾灸组大鼠肠黏膜上皮破损浅,杯状细胞增多,腺体增多、排列趋于整齐,炎性细胞减少;埋线联合艾灸组大鼠肠黏膜上皮破损不明显,杯状细胞明显增多,腺体增多、排列整齐,炎性细胞明显减少。3.结肠黏膜组织Notch 1受体m RNA及蛋白表达水平与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织Notch 1受体m RNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,各治疗组Notch 1受体m RNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）;与埋线组、艾灸组比较,埋线联合艾灸组Notch 1受体m RNA及蛋白表达水平降低明显（P<0.01）。4.结肠黏膜组织Hes 1 m RNA及蛋白表达水平与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织Hes 1 m RNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,各治疗组Hes 1 m RNA及蛋白表达水平均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01）;与埋线组、艾灸组比较,埋线联合艾灸组Hes1 m RNA及蛋白表达水平降低明显（P<0.05或P<0.01）。5.结肠黏膜组织Math 1 m RNA及蛋白表达水平与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织Math 1 m RNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,埋线组、埋线联合艾灸组Math 1 m RNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,艾灸组Math 1 m RNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）、Math 1蛋白表达水平升高（P<0.01）;与埋线组比较,埋线联合艾灸组Math 1 m RNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）、Math 1蛋白表达水平升高（P<0.01）;与艾灸组比较,埋线联合艾灸组Math 1 m RNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论:1.穴位埋线、艾灸、埋线联合艾灸均能明显改善UC大鼠肠黏膜炎症、缓解肠黏膜损伤。穴位埋线联合艾灸改善作用优于单一穴位埋线或单一穴位艾灸,两者具有协同作用。2.穴位埋线、艾灸及两者联合对UC的治疗作用可能是通过下调Notch 1受体及靶基因Hes 1的表达,上调靶基因Math 1的表达,使Hes 1表达和Math 1表达趋于平衡,从而抑制Notch信号通路过度激活而实现的。