土荆芥精油提取、成分分析及其对小菜蛾生物活性的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:yin2002cn2008
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土荆芥(Chenopodium ambrosioides L.)为藜科藜属植物,是一种有特殊气味的草本植物,原产于热带美洲,现广泛分布于世界热带及温带地区。本文采取超临界CO2萃取(Supercritical Fluid Extraction,SFE)方法提取土荆芥精油,通过正交和均匀设计优化提取条件,采用气质联用仪(GC-MS)分析不同地区、不同生育期的土荆芥精油的成分,测定了对-聚伞花素(p-cymen)和a-松油烯(a-terpinene)对小菜蛾(Plutella xylostella L.)幼虫的触杀和熏蒸作用以及对-聚伞花素对小菜蛾乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、谷胱甘肽S-转移酶(glutathione-Stranferase,GSTs)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)的影响,最后采用触角电位(electroantennogram,EAG)方法,测定了土荆芥精油、对-聚伞花素和a-松油烯对小菜蛾雌雄成虫的触角电位反应。采用正交和均匀实验设计优化萃取条件,研究结果表明,超临界CO2萃取土荆芥精油的优化条件为:粒度为40~60目,萃取压力为20 MPa,萃取温度为55℃,分离压力为6 MPa,分离温度为60℃,萃取时间为65 min,CO2流量为34~36 L/h,在此条件下的萃取率为7.92%。萃取率与萃取条件逐步回归方程为:Y=-3.41+6.31X3+0.86X4-0.64X1×X4-0.09X2×X3-2.11X3×X4-0.15X32+1.01X42(Y为萃取率,X1为萃取压力,X2为萃取温度,X3为解析温度,X4为萃取时间)。对不同地区土荆芥精油的成分分析结果表明,福建福州土荆芥精油有18种成分,主要成分为a-松油烯(15.14%)、异除蛔素(isoascaridole,19.90%)、对-聚伞花素(45.62%),占总峰面积的80.66%;福建莆田的有26种成分,主要成分为a-松油烯(20.50%)、对-聚伞花素(55.02%)、异除蛔素(17.04%),占总峰面积的92.56%;福建连城有45种成分,主要成分为a-松油烯(12.16%)、对-聚伞花素(51.94%)、2,5-dimethyl-3-hexyne-2,5-diol(21.06%),占总峰面积的85.16%;福建平潭有19种成分,主要成分为a-松油烯(28.53%)、对-聚伞花素(54.23%)、异除蛔素(11.78%),占总峰面积的94.54%。对不同生育期土荆芥精油的成分分析结果表明,苗期的土荆芥精油有16种成分,主要成分为对-聚伞花素(37.23%)、2,5-dimethyl-3-hexyne-2,5-diol(21.41%)、异除蛔素(12.78%),占总峰面积的71.42%;生长期的有15种成分,主要成分为a-松油烯(21.79%)、对-聚伞花素(37.96%)、异除蛔素(9.14%),占总峰面积的68.89%;成熟期的有17种成分,主要成分为a-松油烯(25.88%)、对-聚伞花素(26.65%)、异除蛔素(24.98%),占总峰面积的77.51%。不同生育期有a-松油烯、对-聚伞花素、3-methyl-6-(1-methylethyl)-7-oxabicyclo[4.1.0]heptan-2-one、4-(1-methylethyl)-benzenemethanol、2,5-dimethyl-3-hexyne-2,5-diol、异除蛔素6种相同成分,占总峰面积的70%左右。对小菜蛾幼虫的触杀和熏蒸活性测定结果表明,对-聚伞花素的点滴或熏蒸的LD50或LC50均小于a-松油烯,说明对-聚伞花素比a-松油烯对小菜蛾具有更高的生物活性。对不同浓度对-聚伞花素点滴和熏蒸处理后小菜蛾的AChE、CarE和GSTs的酶比活力测定结果表明,点滴和熏蒸处理后,AChE、CarE和GSTs的活性随着对-聚伞花素浓度的升高呈下降趋势。对小菜蛾成虫的触角电位测定结果表明,小菜蛾雌虫对对-聚伞花素的EAG反应值高于雄虫,并且随着浓度的增加雌虫反应值增加的幅度高于雄虫;小菜蛾雌虫对a-松油烯的EAG反应值在浓度为5.4 mg/mE时反应最强烈,雄虫刚好相反;小菜蛾雌虫对土荆芥精油的EAG反应值在浓度为8 mg/mL时反应最强烈,雄虫在浓度为20 mg/mL时反应最强烈。
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