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背景:树突状细胞(DC)是专业的抗原呈递细胞,它们是机体防御的前哨,能够引起对侵入的微生物、突变或受损的细胞(可包括肿瘤细胞)、抗原物质的强烈的免疫反应。未成熟的DC具有很强的吞噬功能以获取各种抗原,捕获的大量抗原被有效地切割成短肽,这些短肽与成熟DC表面大量表达的HLAⅠ类和Ⅱ类分子结合,形成共刺激分子。这些特点使得DC在体内外均能有效地激活T细胞和B细胞。因此,如果成熟DC表达了某种能在细胞内累积的蛋白,就有可能成为一种有效的疫苗,激发免疫反应,清除抗原物质。 目的:大部分人类肿瘤中都存在着p53蛋白的积累。用细胞内完整表达的蛋白代替合成多肽,可以不受HLA类型的限制,扩大了临床应用。本研究的重点在如何使成熟的DC获得p53的高表达,也将观察p53蛋白是否能在DC内积累而不引起细胞的凋亡。 材料和方法: 1、利用本室保存的含有突变型全长p53cDNA基因的质粒,以及逆转录病毒质粒pLXSN,构建一个新的重组体,并利用PCR/RFLP和DNA