洛克沙胂对小鼠DNA损伤及VEGF和CD34表达的初步分析

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砷是一种公认的致癌物,可导致皮肤癌、肺癌、膀胱癌等。洛克沙胂虽然毒性较小,但其对细胞DNA损伤作用显著,进入环境后对生物造成潜在的遗传毒性。本试验通过单细胞凝胶电泳技术,研究洛克沙胂对小鼠肝脏和肺脏细胞的DNA影响,初步探讨洛克沙胂作为饲料添加剂对环境生物造成的潜在风险。单细胞凝胶电泳实验中,试验设计为空白对照组、低剂量组(1/10LD50)、中剂量组(1/5LD50)、高剂量组(1/2LD50),洛克沙胂染毒小鼠,染毒时间为1、2、4、6、8d,后处死小鼠,取肝脏、肺脏,制成单细胞悬液,细胞密度调整在106~107个/ml。用改良碱性单细胞凝胶电泳方法,通过CASP软件分析彗星尾部DNA含量、尾矩、Olive尾力矩三个指标。结果表明,小鼠在1/2LD50、1/5LD50剂量组中均表现出明显的DNA损伤,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),在设定剂量范围内呈现一定的剂量-效应关系和时间-效应关系;同时,小鼠在1/10LD50剂量组中也表现出细胞DNA损伤,与空白对照组相比差异显著(P>0.05)。试验结果表明,洛克沙胂可致小鼠肝脏、肺脏细胞DNA明显的断裂和迁移,对细胞DNA造成损伤,各染毒组与空白对照组有显著差异。免疫组化对洛克沙胂诱导的小鼠肝脏、肾脏组织中VEGF和CD34的表达有较好的定位,VEGF和CD34在1/2LD50剂量组中表达明显,VEGF以胞质中呈棕黄色染色为阳性,CD34在血管内皮胞质或细胞膜有阳性表达。在1/5LD50、1/10LD50剂量组未检测出阳性表达。单细胞凝胶电泳实验及免疫组化均表明洛克沙胂对小鼠细胞有DNA损伤作用,且单细胞凝胶电泳能够检测出早期细胞损伤。单细胞凝胶电泳技术可作为砷化合物DNA损伤的有效检测手段。
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