香瓜茄有效成分分离纯化及其活性研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:tony_guang
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香瓜茄(Solanum muricatum),又名人参果、香艳梨、长寿果,是茄科茄属多年生草本植物,不耐高温,也不耐寒冷,果实一般在开花后60天成熟。原产地位于智利安第斯山温带地区、哥伦比亚、秘鲁等地区,我们国家从20世纪80年代才开始引入,主要分布于甘肃、云南地区。香瓜茄富含多种维生素与铁、锌、硒、钼、钴、等人体必需的微量元素,具有降血糖,抗肿瘤、抗炎等生理活性。目前,关于香瓜茄的研究大都停留在营养层面,缺乏深入的机理研究,本文首次对香瓜茄的药理作用和化学活性成分进行研究,为香瓜茄的综合开发提供指导。主要研究内容及结果如下:(1)介绍了香瓜茄的资源分布、植物学特征及其化学组成等研究背景,并结合国内外相关文献对香瓜茄中化学活性成分的研究现状进行整理分析。着重对香瓜茄中的黄酮类化合物、可溶性蛋白、多糖类物质的提取工艺以及活性进行总结。同时,这一部分概况了对香瓜茄不同溶剂提取的提取物的抗炎、降血压、抗氧化以及抗肿瘤活性等。(2)本文以成熟的香瓜茄为原材料,以乙醇做为提取溶剂,以单因素和响应面优化为设计方法,采取回流提取法来探究香瓜茄醇提物浸膏的最佳提取工艺。研究结果表明:影响香瓜茄醇提物浸膏提取率的各因素大小为:提取温度>乙醇浓度>提取时间,确定最优提取工艺条件为:提取温度88℃,乙醇浓度88%,提取时间为2.7 h,在此条件下,香瓜茄乙醇提取物浸膏的提取率为31.56%±1.16%。(3)把香瓜茄醇提物浸膏用蒸馏水溶解悬浮,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到香瓜茄醇提物各萃取部位。采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法以及还原力实验评价香瓜茄醇提物以及各萃取部位的抗氧化能力。研究结果表明香瓜茄醇提物乙酸乙酯萃取部位的抗氧化能力最强,各样品的抗氧化能力按大小排序依次为:香瓜茄乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位>香瓜茄乙醇提取物正丁醇萃取部位>香瓜茄乙醇总提取物>香瓜茄乙醇提取物石油醚萃取部位。(4)以纸片扩散法为研究方法研究了香瓜茄乙醇提取物以及各萃取部位对常见的三种食源性污染菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌)的抑制作用。研究结果表明香瓜茄乙醇提取物以及各萃取部位对上述三种食源性污染菌均有一定的抑制作用,其中乙酸乙酯萃取部位对这三种菌的抑制能力最强,石油醚萃取部位的抑菌能力次之,都大于香瓜茄醇提物,正丁醇萃取部位的抑菌能力最差。(5)以肝癌细胞(SK-Hep-1)为筛选目标,采取CCK-8法检测香瓜茄乙醇提取物以及各萃取部位对该细胞的增殖抑制作用。研究结果显示乙酸乙酯萃取部位抑制SK-Hep-1细胞增殖的能力最强,对细胞的形态影响最大,石油醚萃取部位次之,都远高于其他组分,表明乙酸乙酯部位中蕴含抗肿瘤化学物质最多,为进一步的分离纯化提供了方向。(6)根据本实验第三章和第四章的活性试验的结果,以活性跟踪法为指导,确定综合活性最好的部位(香瓜茄乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位)为分离对象,利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱以及制备色谱等手段对乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行分离与纯化,共得到6种单体化合物。采用核磁(DEPT-135、1H-NMR、13C-NMR)和质谱分析对从香瓜茄乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位获得的单体化合物进行化学结构的解析,并结合相关文献的数据鉴定6种化合物分别为澳洲茄碱(1)、澳洲茄边碱(2)、澳洲茄胺(3)、熊果酸(4)、阿魏酸(5)、表儿茶素(6)。
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