组织型纤溶酶原源活剂(t-PA)cDNA克隆、定点突变及昆虫细胞表达

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackyray
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该文应用RT-PCR技术,从人黑色素瘤Bowes细胞株中扩增出人t-PAcDNA.在国内首次 开展了t-PA在昆虫细胞中的表达研究.为了延长t-PA在血液中的半衰期、抗抑制剂失活作用、增强与纤维蛋白的亲和力及提高纤溶特异性,根据t-PA结构与功能的研究成果及蛋白质分析软件分析,研究人员设计并合成了八条突变引物,用于突变t-PA基因中的八个位点(166A/Y67S,N117Q,Ala<160>-Ser<160>-Ser<165>→Asn<248>-Trp<253>,N184Q,R275E,del296-302,K416Y,,A473S).采用定点突变技术,研究人员获得了一至七个位点发生改变 的t-PA突变体基因.
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