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大量研究表明氧化应激与多种慢性病和急性病，如心血管疾病、癌症、神经紊乱、糖尿病、缺血再灌注和衰老等，有着密切的联系，而抗氧化肽可以参与机体内自由基的清除，从而阻止或降低活性氧对机体的伤害。本课题以鹰嘴豆生物活性肽为材料，以结肠腺癌细胞Caco-2和结直肠癌细胞HT-29为研究对象，研究鹰嘴豆生物活性肽对H2O2诱导的氧化损伤细胞（Caco-2和HT-29）的抗氧化效果以及信号通路Nrf2-Keap1的调控作用，初步探讨鹰嘴豆生物活性肽的抗氧化机制。主要实验结果如下：首先，考察鹰嘴豆生物活性肽对自由基的清除能力。随着活性肽浓度的增大，清除DPPH·和O2—·的能力逐渐增强。活性肽浓度为10mg/mL时DPPH·清除率可达79.2%，O—2·抑制率达到60.0%。实验结果表明鹰嘴豆生物活性肽有较好的抗氧化能力。其次，用不同浓度鹰嘴豆生物活性肽处理细胞后，继而用H2O2作用。测定细胞内的过氧化氢酶（CAT）活力、谷胱甘肽还原酶（GSH-Rx）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力和丙二醛（MDA）含量的变化。在Caco-2细胞中，与阳性对照组相比，当鹰嘴豆生物活性肽浓度为0.5mg/mL时，CAT酶活力、GSH-Rx酶活力和GSH-Px酶活力分别提高了40.2%、54.0%和101.5%；HT-29细胞中，与阳性对照组相比，浓度为0.5mg/mL的鹰嘴豆生物活性肽处理后的细胞内CAT酶活力、GSH-Rx活力和GSH-Px酶活力分别提高了33.2%、31.0%和102.0%。实验结果表明鹰嘴豆生物活性肽对H2O2诱导的氧化损伤细胞有保护作用。再次，采用RT-PCR的方法对Nrf2及其调控的下游抗氧化酶基因（血红素氧合酶HO-1、谷氨酰半胱氨酸合成酶γ-GCS和醌氧化还原酶NQO1）的mRNA的表达量进行测定。实验结果表明，与阳性对照组相比，经鹰嘴豆生物活性肽处理的Caco-2细胞中的Nrf2、HO-1、γ-GCS和NQO1的mRNA的表达量分别增加了3.1、3.0、3.4和3.5倍；HT-29细胞中的Nrf2、HO-1、γ-GCS和NQO1的mRNA的表达量分别增加了2.9、3.0、3.6和3.2倍。实验结果表明活性肽处理后的细胞Nrf2、NQO1、HO-1和γ-GCS的mRNA表达量均有显著性升高，活性肽对Caco-2细胞和HT-29细胞有明显的保护作用。最后，采用Western Blot方法对Nrf2及其调控的下游抗氧化酶(HO-1、γ-GCS、NQO1以及GAPDH)的蛋白表达量进行测定。实验结果表明，随着鹰嘴豆生物活性肽浓度的增大，Caco-2细胞和HT-29细胞内的Nrf2和抗氧化酶的蛋白表达量呈现出增大的趋势。通过mRNA表达量的变化和蛋白表达量的变化发现鹰嘴豆生物活性肽能够激活Nrf2-Keap1信号通路，引起Nrf2从Keap1上解离，进而促使下游目的基因的转录和表达，证明鹰嘴豆生物活性肽对氧化损伤的Caco-2细胞和HT-29细胞具有显著的保护作用，在与氧化应激有关的慢性疾病的预防中有着良好的应用前景。