论文部分内容阅读
牡丹皮为常见大宗药材,市场交易量大。目前市场上牡丹皮商品规格等级划分较为随意,缺乏统一的标准,且除沿用传统按照产地以及去皮与否划分规格,按照直径大小划分等级外,还存在较为普遍的以硫磺熏蒸的程度划分规格（高硫、低硫、无硫）及按去心率的高低划分不同等级的现象。而我国现行的《76种药材商品规格标准》中牡丹皮商品规格等级划分与现行《中国药典》对牡丹皮药材性状规定存在较大的出入。因此,亟待制订适应新时期市场需求的牡丹皮商品规格等级标准,以规范牡丹皮药材市场交易,引导市场优质优价,形成良性循环。本研究通过商品调查,梳理当前市场牡丹皮药材规格等级现状,并通过广泛收集多批次药材,进行性状测量,总结当前规格等级划分的性状数据规律。在此基础上,运用UPLC-Q-TOF-MS和UPLC-Q-TRAP-MS-MS、多糖含量测定、SO2残留量测定等方法对当前牡丹皮在市场流通过程中,影响其规格等级划分要素:产地、加工、产地分级等进行了全面系统的分析,为制定牡丹皮商品规格标准提供科学依据。1.对不同规格等级的牡丹皮药材进行产地及市场调查,采集牡丹皮样品,并对其性状数据进行测定。结果表明:市场上流通的牡丹皮主要按照产地分为亳丹皮、凤丹皮和川丹皮,其中以亳丹皮产量最多,凤丹皮质量最佳,川丹皮产量逐年减少,现市场流通量较少;按照是否去皮其他产地的牡丹皮分为刮丹皮和连丹皮,而凤丹皮均未刮皮;又按照直径大小分为不同的等级,其等级划分较为随意,与《76种药材商品规格标准》存在较大的差异。此外,市场上尚存在熏硫量及抽芯率高低划分规格等级的现象。2.建立了牡丹皮药材UPLC-Q-TOF-MS分析方法,对牡丹皮中不同类型化学成分的质谱裂解规律进行了总结,并对牡丹皮中化学成分进行了详细系统的质谱解析,共解析牡丹皮所含化学成分119个。为后续不同产地,不同加工处理方法,不同等级的化学成分的研究奠定了基础。3.熏硫作为一种传统产地加工方法,目前在很多根茎类药材的产地加工中仍然存在,牡丹皮在市场上按照熏硫量的高低分为高硫货、低硫货和无硫货。为防止已熏硫的中药材被检出SO2残留量超标,市场上还存在脱硫的现象。因此,针对牡丹皮熏硫和脱硫的问题,主要运用UPLC-Q-TOF-PDA-MS及代谢组学分析方法对熏硫前后、脱硫前后化学成分进行分析。结果共鉴定了13种含硫产物,并发现,在熏硫的过程中多种初级苷类含量降低,而次级苷的含量升高。与熏硫样品相比,除SO2残留量大幅度降低以外,脱硫样品中多种化学成分的含量亦很大程度上降低,导致熏硫牡丹皮质量进一步降低。这两种加工方式均会对牡丹皮质量产生不利影响,因此,建议牡丹皮在产地加工中应禁止熏硫,本次标准制订也未将熏硫量的高低作为规格等级划分标准。4.市场上流通的牡丹皮以亳州产为主,以铜陵为佳,垫江丹皮作为传统道地药材,受多种因素的影响,产量逐年降低。因此,选取这三个不同产地的牡丹皮药材,分析了不同产地牡丹皮化学成分差异。结果表明:亳州和铜陵牡丹皮差异不明显,而垫江和安徽丹皮差异较为明显。六没食子酰葡萄糖苷和七没食子酰葡萄糖苷及丹皮酚在安徽产丹皮中相对含量较高,而多糖、丹皮酚苷（丹皮酚新苷、丹皮酚原苷、Paeonol-O-β-D-glucoside和Suffruticoside A）、芍药苷类（芍药苷、苯甲酰芍药苷、Isomer of galloylpaeoniflorin）和Methyl gallate、Galloyl-3-O-methyl gallate在垫江丹皮中相对含量较高。由于垫江丹皮产量逐年降低,目前在市场上流通量较少,故未将川丹皮单独列为一个规格,而铜陵牡丹皮生产加工较为规范,规格等级划分较为统一,且市场上普遍以铜陵牡丹皮质量最佳,故本次标准将牡丹皮按照产地将其分为凤丹皮和其他产地丹皮。5.针对连丹皮、刮丹皮及按照抽心率划分等级的问题,对牡丹根不同部位化学成分进行比较分析,结果表明:牡丹根栓皮中含有的化合物种类最为丰富,有些成分仅在栓皮中检出,其中芍药苷类和鞣质类成分的种类和数量均较多;韧皮中寡糖和丹皮酚苷类成分较多;木心中所含化学成分的种类最少,且多种成分含量较低。木心作为非药用部位,在《中国药典》中明确规定杂质不能超过3%,而本次标准基于药典,因此不再对其另作限量标准。考虑加工成本,建议在产地加工中不刮皮。但由于市场上除铜陵丹皮外大量存在刮丹皮,且药典亦收载了刮丹皮加工方法,故本次标准仍将其他产地的牡丹皮分为连丹皮和刮丹皮。铜陵丹皮在产地加工中不去皮,因此不再按照是否去皮划分其规格。6.运用UPLC-Q-TRAP-MS-MS及紫外分光光度法分别建立了牡丹皮中10种次生代谢产物及多糖含量测定方法,对不同等级的牡丹皮药材中的次生代谢产物及多糖含量进行了测定,对化学成分与性状大小之间的相关性进行了分析,结果表明牡丹皮中多种次生代谢产物的含量高低与其外观大小成负相关性,而多糖含量与外观性状大小成正相关性,随着抽心率的提高,牡丹皮药材中多糖呈现小幅度升高的趋势,而其他次生代谢产物的含量略呈下降的趋势。因此,不能仅根据牡丹皮药材中某几种化学成分的含量来判断其品质好坏。为方便牡丹皮药材市场交易,本次标准仅按照直径及长度大小将其分为不同的等级,未按照化学成分的含量进行划分。基于以上研究,本次牡丹皮商品规格等级标准将凤丹皮归为一个规格,其他产地丹皮分为刮丹皮和连丹皮两个规格,各规格项下又按照直径和长度分为不同等级。产地加工所带来的化学成分的差异比不同产地及直径大小的差异大,对药材质量产生较大影响,而现行药材标准对此没有明确要求。因此,应当加强市场监管,特别是其在加工、储藏过程中的管理控制。同时,应针对这些问题开展相关快检技术及科学的中药材加工储存技术研究。