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目的脂质代谢稳态与核黄素营养状态关系密切,而apolipoprotein B100(apo B100)在脂质运输中起关键性作用。本研究主要目的是探讨核黄素营养水平对脂质代谢的影响,并研究apo B100与脂代谢稳态之间的联系以及在这个过程中起到的关键作用,最后探索核黄素营养水平对相关生理功能造成的影响。方法1、将Wistar大鼠分成核黄素缺乏组(RD)、正常对照组(AF)、对喂组(PF)、核黄素充裕组(RR),分别饲喂含3 mg/kg核黄素、含6 mg/kg核黄素、含12 mg/kg核黄素的AIN-93 M饲料1个月,测定红细胞谷胱甘肽还原酶(erythrocyte glutathione reductase,EGR)活性,发现未达到核黄素缺乏状态,将RD组饲料替换为不添加核黄素的AIN-93 M饲料,其余各组不变,继续饲喂1个月,测定EGR活性,发现核黄素缺乏模型建立成功,处死大鼠,测定血浆中核黄素、肝脏中核黄素、FAD和FMN浓度,饲喂期间记录大鼠每日摄食量和每周的体重;2、按照上述方法饲喂大鼠,测定血浆VLDL-c、LDL-c、HDL-c、TC、TG浓度,测定肝脏总脂肪含量,TC、TG浓度,HMG-Co A还原酶活性;3、按照上述方法饲喂大鼠,分别利用q PCR和Western blot方法测定肝脏apo B100、ERO1、PDI、GRP78和CHOP m RNA和蛋白质表达变化;4、按照上述方法饲喂大鼠,测定不同核黄素营养水平下的大鼠骨密度变化,依次测定血浆25-(OH)VD3、骨钙素、ALP浓度,测定骨钙含量。结果1、RD组的大鼠饲喂不添加核黄素的AIN-93饲料(核黄素含量0.05 mg/kg)后的第10天,RD组的膳食摄入量下降了11%;在实验结束时,RD组的膳食摄入量进一步减少了29%;与AF组的大鼠相比较,RD组的大鼠体重也明显地降低了12%。与AF组相比,RD组的大鼠的EGR活性降低了54%,血浆中核黄素浓度下降了95%,而且本组大鼠血浆核黄素浓度降低到了10 nmol/L以下;RD组的大鼠肝脏的核黄素浓度降低了45%,肝脏FAD和FMN的浓度分别降低了41%和35%;2、RD组的大鼠血浆VLDL-c和LDL-c水平显著性降低,与AF组大鼠相比,RD组大鼠的血浆TC和TG浓度明显降低;RD组大鼠肝脏总脂肪含量明显升高,TC,TG浓度也明显增高;与AF大鼠相比,RD大鼠肝中HMG-Co A还原酶的活性下降了28%;3、与AF组的大鼠相比,核黄素缺乏大鼠apo B100的m RNA和蛋白表达显着降低;参与apo B100氧化折叠的ERO1和PDI蛋白质表达水平也显著降低;4、RD组的大鼠股骨骨密度显著低于AF组大鼠;与AF组相比,RD组血浆25-(OH)VD3浓度明显地升高,血浆骨钙素浓度明显上升,血浆ALP浓度明显下降,RD组骨钙浓度明显下降。结论1、膳食核黄素缺乏影响Wistar生长发育,血浆核黄素对膳食核黄素水平敏感,而肝脏在核黄素缺乏状态下能够快速摄取核黄素并储存起来,因此肝脏核黄素消耗速率较慢;2、膳食核黄素营养水平影响机体脂质代谢稳态,降低肝脏胆固醇合成速率,阻碍脂质由肝内向肝外转运,使肝脏脂质蓄积,血浆脂质水平下降,其他需要胆固醇的组织得不到充足供应;3、膳食核黄素营养水平影响apo B100表达进而影响脂质转运,核黄素摄入不足影响ERO1和PDI表达,导致apo B100氧化折叠受损;另外,核黄素缺乏诱发内质网应激反应,调控肝脏胆固醇合成速率下降,并阻碍胆固醇外流;4、膳食核黄素缺乏导致骨密度下降,同时测定血浆中25-(OH)VD3、骨钙素和ALP浓度发现,膳食核黄素影响成骨细胞功能,引发骨代谢异常。