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目的:观察MAP4K1表达水平改变对膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖、侵袭及迁移的影响,为膀胱癌的诊治提供新的思路。材料与方法:以膀胱尿路上皮癌T24细胞(简称T24细胞)为研究对象,实验分组为:空白对照组(T24细胞组),阴性对照组(T24细胞+MAP4K1-NC组),抑制组(T24细胞+MAP4K1-homo-524),过表达组(T24+MAP4K1过表达载体)。各组细胞接种24h后,利用Lipofectamine TM 2000分别向阴性对照组、抑制组及过表达组T24细胞内转染体外合成的MAP4K1-NC片段、MAP4K1-homo-524片段、MAP4K1过表达载体。(1)转染6h后于荧光显微镜下观察各组转染率,细胞的转染效率达到80%以上可进行后续的实验。(2)转染后于24h、48h、72h,MTT实验检测各组细胞OD值。(3)转染24h后行Transwell实验,检测各组细胞跨膜个数。(4)转染24h后进行细胞划痕,并继续培养24h、48h、72h,划痕实验检测各组细胞划痕愈合率。结果:1)荧光显微镜下观察T24细胞中阴性对照组、抑制组、过表达组的转染情况,显示细胞转染效率达到80%以上,可进行后续实验。(2)MAP4K1表达水平改变对T24细胞增殖能力的影响:MTT实验结果显示MAP4K1过表达组转染24小时、48小时及72小时后,OD值分别为0.601±0.021、0.822±0.029、1.012±0.039;其增殖率分别为7.5%±0.4%、11.8%±0.7%、14.1%±0.9%。MAP4K1抑制组转染24小时、48小时及72小时后,OD值分别为0.484±0.026、0.625±0.028、0.694±0.042;其抑制率24h、48h、72h分别为:10.5%±0.6%、14.3%±0.8%、16.8%±1.0%。两组结果分别与空白对照组、阴性对照组对比,差异性显著(P值均小于0.05,)。空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异(P值大于0.05)。(3)MAP4K1表达水平改变对T24细胞侵袭能力的影响:Transwell侵袭实验结果显示,细胞转染24小时后,MAP4K1过表达组穿膜细胞数为45±2.5个,MAP4K1抑制组穿膜细胞数为28±2.0个,分别与空白对照组35±1.8、阴性对照组38±1.6对比,差异性显著(P值均小于0.05)。空白对照组与阴性对照组相比无显著性差异(P值大于0.05)。(4)MAP4K1表达水平改变对T24细胞迁移能力的影响:划痕24小时后,MAP4K1过表达组、MAP4K1抑制组划痕愈合率分别为14.73%±0.84%、5.16%±0.75%,分别与空白对照组8.39%±0.55%、阴性对照组7.90%±0.89%相比,差异性显著(P值均小于0.05);划痕48小时后,MAP4K1过表达组、MAP4K1抑制组划痕愈合率分别为27.43%±0.8%、9.94%±0.85%,分别与空白对照组13.82%±0.85%、阴性对照组13.28%±0.86%相比,差异性显著(P值均小于0.05);划痕72小时后,MAP4K1过表达组、MAP4K1抑制组划痕愈合率分别为29.69%±0.78%、11.35%±0.43%,分别与空白对照组17.24%±0.80%、阴性对照组16.34%±0.90%相比,差异性显著(P值均小于0.05)。结论:MAP4K1能增强T24细胞增殖、迁移及侵袭能力,提示MAP4K1与膀胱尿路上皮癌的发生、发展有密切关系。