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本工作采用融合蛋白技术,以葡萄糖氧化酶(GOD)为模式酶,在葡萄糖氧化酶的C末端引入能与介休二茂铁甲酸特异接合的聚赖氨酸肽。同时设计了连接肽插入到聚赖氨酸肽和蛋白质之间,以减小聚赖氨酸肽对蛋白表达及其酶活的影响。含连接肽和聚赖氨酸肽的葡萄糖氧化酶在酵母表达系统Pichia pastoris中成功表达。融合蛋白用Q-Sephrose FastFlow进行纯化,并测其动力学参数。与野生型GOD相比,其动力学参数无明显变化。用二茂铁甲酸修饰的商品酶、野生型酶和融合有聚赖氨酸肽的葡萄糖氧化酶,其剩余的酶活分别为修饰前酶活的22.43%、22.17%、90.01%。电化学检测表明,用修饰的融合蛋白制备的丝网印刷葡萄糖传感器,酶与电极间的电信号明显高于用商品酶和野生型酶制备的传感器,检测范围宽(可达45mmol/L)。同时由于小分子介体被结合到葡萄糖氧化酶大分子上,使之更容易在电极上固定,不易从电极表面上逃逸,因此可使电极的寿命延长。这一方法为构建高电子传递速率的酶分子系统提供了一种有效的途径。