【摘 要】
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目前,对多肽类的研究已经逐渐拓展到各个方面,研究对象也从传统的多肽激素延伸到多种用途的小肽类。传统的小肽分离纯化多使用反相色谱法和凝胶层析法,这两种方法在扩大生产
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目前,对多肽类的研究已经逐渐拓展到各个方面,研究对象也从传统的多肽激素延伸到多种用途的小肽类。传统的小肽分离纯化多使用反相色谱法和凝胶层析法,这两种方法在扩大生产方面都存在着不同程度的问题。传统常用的凝胶介质由于机械强度较差且价格昂贵,在扩大生产规模方面的应用受到很大限制。本研究引入小分子分离的理念,选用物化稳定性高、吸附选择性好、再生简便、解吸条件温和、使用周期长、适用于工业化生产的大孔树脂作为分离介质,选取TP5为模型肽,采用Langmuir吸附等温方程,利用规划求解,考察了pH值、起始溶液浓度,温度,搅拌转速等因素对多肽吸附平衡的影响,并为动力学研究提供一些基础数据。研究发现,随着pH值的升高,TP5与阳离子交换剂配基间的静电引力减弱,吸附容量下降,扩散系数下降。在离子交换色谱的应用中根据该性质可以利用升高pH值的方法对多肽进行洗脱。同时,对TP5与NH-1树脂动态吸附行为的研究也进一步验证了其静态吸附热力学的理论,其吸附反应为放热反应,升高温度对于吸附反应的进行无促进作用。通过间歇动力学实验,采用两相阻力模型和平行扩散模型拟合不同条件下NH1吸附TP5的速率曲线求得扩散系数,分析了TP5在阳离子交换剂NH1中的扩散行为。结果表明,随着温度的升高和pH值的降低,小肽在阴离子交换剂中的扩散系数总体上呈增大趋势。同时,对TP5在NH-1树脂上的解吸性能进行了研究,通过实验选择了0.05N浓度的氨水作为洗脱剂。所得洗脱率为100%,TP5纯度大于95%。本研究还详细分析了胸腺五肽与离子交换剂之间的相互作用,对于深入了解肽类分子离子交换平衡和动力学机理,以及离子交换色谱技术的应用具有一定的理论意义和实用价值。
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