过敏性疾病已被世界卫生组织列为二十一世纪重点防治的三大类疾病之一，是当前世界性的重大卫生学问题。食物过敏作为一种常见的过敏性疾病，引起的临床症状主要有头晕、头痛、胸闷、恶心、呕吐、皮肤瘙痒等，严重时还会休克甚至死亡。因此，开展食物(特别是海产品)的过敏原研究对保护人们生命健康，提高人民生活质量具有巨大的经济效益和社会效益。 本研究选用我国华南地区常见的食用蟹种--红星梭子蟹(Portunus sanguinolentus)作为研究对象，运用SDS-PAGE技术对粗提液蛋白(生、熟红星梭子蟹)进行初步分离，利用蟹过敏患者血清通过免疫印迹分析红星梭子蟹过敏原组分，初步鉴定出生蟹粗提液中有17条过敏蛋白条带，其中7条为主要致敏组分，分子量分别是：22kD、27kD、35kD、37kD、38kD、40kD和45kD；熟蟹粗提液中有3条过敏蛋白条带，分子量分别为38kD、61kD和95kD。 同时，本研究利用生物信息学和分子生物学方法根据甲壳类的泛过敏原原肌球蛋白基因的高度保守性设计简并引物，通过RT-PCR克隆出红星梭子蟹蟹肉中过敏原原肌球蛋白的全长基因，包括一个编码285个氨基酸的开放阅读框。序列分析结果显示克隆得到的基因与已知虾、蟹、龙虾等的原肌球蛋白过敏原基因有较高的同源性(>80％)。根据过敏原的命名规则，将其命名为Por s l，并提交GenBank数据库，登录号为：EFl43836。将蟹原肌球蛋白完整开放阅读框与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3)，经诱导重组蛋白获得高效表达，Ni<2+>亲和层析柱纯化后，Westem-blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫学活性，MALDI-TOF-MS质谱分析进一步证实了该重组过敏原的正确性。 本研究初步鉴定出红星梭子蟹(生、熟)主要过敏原蛋白，并成功克隆和表达了具有免疫学活性的重组红星梭子蟹原肌球蛋白，为进一步研究蟹类过敏原的结构与功能奠定了一定的理论基础，并为蟹过敏性疾病的特异性诊断和免疫治疗奠定了基础。