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背景与目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。目前研究认为表观遗传学的改变如甲基化,乙酰化等与原发性乳腺癌中发生的密切相关。近年来,生物治疗如CIK等在临床肿瘤的治疗中取得了一定的效果,然而仍然有众多的乳腺癌患者对生物治疗不敏感而导致肿瘤的复发或转移。如何安全,有效的提高乳腺癌患者的生存质量,延长生存期,则成为生物治疗的研究的热点。因此,通过逆转异常表观遗传学改变,去甲基化药物与生物治疗联合使用,可能是乳腺癌患者治疗的新靶点。为此我们探讨去甲基化药物地西他滨单独或联合TRAIL对乳腺癌MDA-MB-231细胞及正常乳腺MCF-10A细胞的增殖和凋亡的影响,检测体外培养CIK细胞的表型,并观察地西他滨是否协同CIK对肿瘤细胞杀伤及对正常乳腺细胞的影响。方法应用MTT方法检测不同浓度的地西他滨应用24,48h及TRAIL应用24h对乳腺癌MDA-MB-231细胞及正常乳腺MCF-10A细胞的增殖影响；并采用流式细胞仪检测TRAIL单独或联合地西他滨处理乳腺癌MDA-MB-231细胞及MCF-10A细胞24h后对细胞凋亡的影响。从3个健康的志愿者中抽取20ml的外周血,分离PBMCs,经加入RPMI1640，10%胎牛血清，30ng/mL IL-2，10ng/mL IL-15单抗，在37℃5%CO2培养，每2天半量换液,培养5天后流式细胞仪检测CIK细胞表型。经LDH释放法检测不同效靶比的CIK单独或联合50μmol/L的DAC作用24后对乳腺癌MDA-MB-231细胞及MCF-10A细胞的杀伤率。结果DAC对MDA-MB-231有轻微的细胞增殖抑制作用，对正常乳腺上皮MCF-10A无明显的作用。MDA-MB-231细胞在不同浓度的TRAIL作用浓度下，24h的IC50为100ng/mL，然而TRAIL对MCF-10A无杀伤效应。MDA-MB-231细胞经0.05、0.5、5、50μmol/L的DAC预处理24h，联合100ng/mL TRAIL作用24h的凋亡率与单独100ng/mL TRAIL组比较差异有统计学意义（P<0.05或<0.01），且与DAC呈剂量依赖性(P<0.05)。正常乳腺上皮细胞MCF-10A无明显凋亡产生。体外培养5天的CIK细胞中CD3+CD56+的NKT细胞为36.24%±3.45%，TRAIL的表达率为28.9%±9.7%。 MDA-MB-231经DAC预处理24h后，5:1、10:1、20:1效靶比的CIK对MDA-MB-231的杀伤率分别为18.6%±2.6%、26.3%±4.5%、51.6%±6.6%，与相应单独效靶比的CIK杀伤比较，P<0.01。结论地西他滨对乳腺癌及正常乳腺细胞无明显增殖抑制作用，地西他滨能协同CIK细胞诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡，协同作用可能是通过TRAIL途径实现。并为临床CIK联合地西他滨联合使用的安全性提供依据。