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背景创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury, TBI)是神经外科常见的疾病,发病率近年来逐渐上升。目前,在各种创伤性疾病中,创伤性颅脑损伤的致死率、致残率均位居第一名。由于创伤性颅脑损伤而遗留的各种并发症给患者家庭及社会带来沉重的负担。研究表明人脐带间充质干细胞移植对受损脑组织有一定的修复作用；神经生长因子具有神经元营养和促进轴突生长的作用。但两者单独使用效果并不理想。目前,国内外对两者联合共同作用于脑损伤大鼠的空间学习记忆能力的研究较少。本研究将人脐带间充质干细胞移植和神经生长因子联合共同用于脑损伤后空间学习记忆能力的恢复。目的观察使用神经生长因子联合人脐带问充质干细胞移植对脑损伤大鼠行为学和空间学习记忆能力的影响,探讨其对损伤脑组织的修复作用及其机制。材料与方法体外培养人脐带间充质干细胞,将传至第3代的细胞浓度调整为1×109L-1。使用自由落体硬膜外撞击法建立脑损伤(TBI)模型。80只SD大鼠被随机分为4组：A组为假手术组,B组为模型对照组、C组为人脐带间充质干细胞移植组、D组为细胞移植+神经生长因子组,20只/组。在脑损伤后第3d,A组不作处理,B组经尾静脉注射lml的磷酸缓冲液(Phosphate Buffer solution,PBS), C组和D组经尾静脉注射1.0×109L-1的人脐带问充质干细胞1m1,并且D组大鼠术后当天起每天都行腹腔注射NGF3μg/kg,持续14d。于细胞移植前及移植后第7,14,21d对大鼠进行改良神经损伤程度评分(]mNSS)。在TBI后第23-27d进行Morris水迷宫(Morris Water Maze, MWM)实验。在TBI后第28d,处死各组大鼠,观察各组大鼠海马齿状回区5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫组化结果。并同时观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经巢蛋白(Neural nest protein, Nestin)在脑组织中的表达情况。结果在大鼠颅脑损伤17d后,其神经运动感觉功能的恢复表现出差异性,其mNSS评分结果为,A组神经运动感觉功能正常为0分,B组(7.80±0.52),C组(6.55±0.69)和D组(5.85±0.75),差异有统计学意义(P<0.05)。Morris水迷宫实验显示大鼠的平均潜伏期在第2d起,C组和D组的差异明显,其结果为,A组(31.1±3.91),B组(56.80±4.84),C组(44.25±4.36)和D组(39.77±5.69),差异有统计学意义(P<0.05)。在定向航行实验结束4h后进行的空问探索实验,穿越平台次数结果为,A组(8.95±1.32),B组(3.45+1.57),C组(5.35±1.46)和D组(6.85±±1.14),差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠海马齿状回区BrdU阳性细胞数为A组未见,B组(3.55±±1.79),C组(14.50±±4.12)和D组(21.20±±3.78),差异有统计学意义P<0.05)。受损脑组织中,胶质纤维酸性蛋白GFAP的面积百分比为,C组(4.08±1.14),D组(5.16±1.26)；神经元特异性烯醇化酶阳性表达率显示为C组(0.72±0.29),D组(1.02±0.31)；神经巢蛋白的面积百分比为C组(1.23±0.26)%,D组(1.46±0.23)%；差异有统计学意义(P<0.05)。结论人脐带间充质干细胞促进神经元修复,改善脑损伤大鼠的行为能力及空间学习记忆能力,与神经生长因子联合使用使其作用更为显著。