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目的:明确hENT1在5-FU跨膜转运和返流中的作用,以及返流对5-FU在细胞内浓度的影响。
方法:将能特异性下调hENT1的重组及对照质粒用脂质体法转染到SW1990细胞内,RT-PCR检测hENT1mRNA表达情况。分别培养SW1990、pSilence-hENT1SiSW1990、pSilence-ControlSW1990细胞,三组细胞均置于含5-FU100mg·L-1的DMEM中温浴。各组取等量细胞刮取液2份,一份用毛细管区带电泳测定5-FU含量、另一份作平行样本测定蛋白含量,最后计算细胞内5-FU浓度。
结论:干扰hENT1表达可以提高5-FU在SW1990细胞内浓度。hENT1是SW1990细胞向外返流5-FU的主要通道。