柑桔黄龙病病原DNA的克隆、序列分析及探针制备

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wudifeng20008
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该研究利用聚合酶链式反应技术(PCR),合成了柑桔黄龙病病原16S核糖体DNA(rDNA)上的一段DNA.将此DNA片段插入到pUC18的EocRI位点,并转化进大肠杆菌(Escherichia coli)的DH5α菌株中.PCR、限制性内切酶(EcoRI)及序列分析均表明克隆成功.序列分析结果表示,克隆片段与已 知相应序列间同源性达98.6%.该研究还利用地高辛(Digosigenin)对该克隆片段进行了标记,制备成非放射性DNA探针.斑点杂交(dot-blot hybridization)初步研究表明,所制备的探针可有效地检测出柑桔黄龙病病原.该研究在国内外首次制备了柑桔黄龙病病原非放射性DNA探针.
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