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解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)因其独特的理化性质、成熟的分子操作系统以及安全性被作为合成生物学的底盘微生物。随着合成生物学的发展,利用分子生物学手段可精准对解脂耶氏酵母基因组进行编辑,开发出高版本的酵母底盘微生物。但目前,该酵母可用的筛选标记非常有限,增加了基因编辑——基因敲入与敲出的难度,因此开发出更多有效的酵母筛选标记对提高分子操作的效率十分重要。本研究以解脂耶氏酵母作为底盘生物,成功开发出以木糖醇脱氢酶作为筛选标记的方法。在解脂耶氏酵母中异源表达木糖醇脱氢酶基因,使得该酵母能以木糖醇作为唯一的碳源,在基本培养基中能够良好的生长。相对于其它的筛选标记如:抗生素潮霉素与遗传霉素等,木糖醇作为筛选试剂具有安全且廉价的优点。通过对不同的木糖醇脱氢酶的酶学性质进行研究,发现来源于Scheffersomyces stipitis CBS6054的木糖醇脱氢酶能够将赤藓糖醇氧化为赤藓酮糖,还能将赤藓酮糖还原为苏糖醇。预示该酶能将赤藓糖醇转化为苏糖醇。接着我们将Scheffersomyces stipitis CBS 6054木糖醇脱氢酶基因在解脂耶氏酵母CGMCC7326中进行异源表达并成功获得酵母工程菌HC110,发现异源表达该木糖醇脱氢酶的酵母能够以葡萄糖为底物发酵合成苏糖醇,首次实现了由葡萄糖直接高效发酵合成苏糖醇,产率达37.3%。为了提高发酵液中苏糖醇的纯度,使用酵母Candida parapsilosis CGMCC2.431介导的生物净化方法对发酵液进行生物净化,使得发酵液中苏糖醇的纯度达到98%以上。本研究不但开发了一种有效的解脂耶氏酵母筛选标记,而且利用此筛选标记开发了一步法由葡萄糖发酵合成苏糖醇的解脂耶氏酵母工程菌株,简化了苏糖醇的传统合成方法。