鳙鱼中多聚磷酸盐水解机理及无磷保水剂的研究

被引量 : 48次 | 上传用户:PM123nx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
1.建立了水产品中多聚磷酸盐测定的离子色谱法。利用Dionex ICS 2000型离子色谱,AS11-HC型阴离子分离柱,以KOH为淋洗液,采取程序梯度洗脱可以定性定量分析单磷酸盐(Pi)、焦磷酸盐(PP)、三聚磷酸盐(TPP)和六偏磷酸盐(HMP)。0.005-0.5mmol/L的范围内均呈现良好的线性相关性,r2>0.99。在鳙鱼肉中的回收率为99-111%,能够用以测定鳙鱼和其它水产品中多聚磷酸盐。2.对不同水产品中多聚磷酸盐的水解规律进行了研究。离子色谱法可以准确地测定焦磷酸四钠(TSPP)和三聚磷酸钠(STPP)在不同水产中的水解过程。STPP水解分为两步,首先被水解成PP和Pi,其次生成的PP被进一步水解成Pi。而TSPP直接被水解成单磷酸盐。3.利用Dionex ICS 2000型离子色谱,可以非常准确地测定ATP、ADP和Pi。ATP、ADP和Pi在0.01-0.1mmol/L测量浓度范围内具有很好的线性相关性,相关系数均大于0.997,在此基础上建立了腺苷三磷酸酶(ATPase)活性的离子色谱测定法。4.对鳙鱼焦磷酸盐水解酶(PPase)进行了分离纯化和生化特性的研究。肌肉通过0.05 mol/L KCl-20 mmol/L tris-HCl(pH 7.0)缓冲液漂洗得到的粗酶液,经过50%~80%(NH42SO4饱和度分段盐析,50℃加热处理,经DE52阴离子交换层析,再经Sephacryl S-300凝胶层析可以得到在native PAGE和SDS-PAGE图谱上呈现单一蛋白条带的纯化酶。纯化倍数为114.5倍,酶活回收率为4.5%。PPase的相对分子量为50kDa,是有两个相同的亚基构成,最适温度和pH分别为50℃和8.0,热稳定性不强,在pH5.0-10.的范围内有着很好的稳定性。Mg2+是必需金属离子,当Mg2+浓度与底物浓度比值≧1时,酶活性较高且保持稳定;但当比值≦1时,底物对酶有抑制作用。低浓度的EDTA可以激活酶,而高浓度却能强烈抑制酶活。NaBr和二硫苏糖醇(DTT)可以增强酶活性,而柠檬酸钠和亚硫酸氢钠却强烈抑制酶活。PMSF能完全抑制酶活性,该酶可能为丝氨酸酶。在5mmol/LMg2+浓度下,PPase水解焦磷酸四钠的Km为1.98mmol/L。5.通过逐层剖析法证明了肌球蛋白头部S-1具有三聚磷酸盐水解酶(TPPase)活性,并阐明了鳙鱼肌球蛋白头部S-1 TPPase的生化特性。纯化的鳙鱼TPPase水解TPP的最适温度为30℃。TPPase在30°C下比较稳定,而在70°C下迅速失活。TPPase最适pH值为5.0和8.0,在中性偏酸的环境中较稳定。Mg2+浓度低于17mmol/L时能激活TPPase,但高于17mmol/L却起到了抑制作用。当KCl浓度由0.1 mol/L提高到0.3 mol/L时TPPase活性迅速升高并趋于稳定。EDTA-Na2能显著抑制TPPase活力。TPPase对于氧化剂和还原剂都比较稳定。在最适条件下测定鳙鱼TPPase的米氏常数为3.2mmol/L。6.研究了三种多聚磷酸盐对肌原纤维蛋白结构的影响,探讨了提高保水性的机理。提出了TSPP提高保水性的机理为:一,通过提高静电斥力使肌原纤维横向膨胀,增加肌原纤维内部的空间;二,从A带两端提取蛋白,增加I带空间;三,从H带提取蛋白,增加A带内部空间;四,焦磷酸盐水解过程中化学键释放的能量可能提供了动力,能破坏肌球蛋白和肌动蛋白的连接,使肌原纤维小片化。STPP作用途径:一方面通过静电斥力使肌原纤维横向膨胀;另一方面提高离子强度增加蛋白质的溶解;第三方面是通过TPPase水解成PPi,然后以PPi形式发挥作用。六偏磷酸盐主要作用可能是通过螯合金属离子影响三聚磷酸盐水解酶和焦磷酸盐水解酶活性,进而影响三聚磷酸盐和焦磷酸盐的作用。7.对磷酸盐替代物进行了研究。利用过氧化氢裂解法获得的分子量大于6kDa的褐藻酸钠裂解物HDX-A能有效的增加南美白对虾虾仁的浸泡增重效果。HDX-A可以显著保持冷冻虾仁浸泡增重效果,防止了解冻损失,降低了蒸煮损失。在南美白对虾冷冻虾仁应用效果优于B542复合磷酸盐。提出HDX-A提高冷冻虾仁的保水性的可能机理为:一,通过渗透作用进入到虾仁内部,利用自身膨胀增加了肌束之间和肌原纤维之间的空间,并形成空间上的网络结构,增强了结构的稳定性;二,与肌原纤维蛋白结合,增强蛋白质的稳定性,防止肌球蛋白的变性;三,大分子量的裂解物可以吸附并保持大量的水分子;四,在虾仁表面通过Ca2+、Mg2+等离子形成凝胶膜,阻止了内部水分的流失。
其他文献
应用水提法分离钝顶螺旋藻藻蓝蛋白后,考察了螺旋藻细胞破碎液的藻液比、盐离子浓度、pH和环境温度等对藻蓝蛋白分离的影响,并对藻蓝蛋白的耐热性能及耐酸碱性能进行了研究.
古斯塔夫·克里姆特(1862-1918)关于女性的题材作品分为三类:寓意画、女性肖像画和女人体素描。其中女性作为寓意画的唯一主体,是高度体现他的生理、心理和思想的载体。本论文通过结合克里姆特所处的时代、家庭、个人等背景,分析他不同艺术创作时期女性形象的转变,以及女性题材作品中爱情、同性、生育和死亡四大主题。从而探讨他在表现人体为主要创作题材时,他作为男性内心的本能诉求以及人们对生命来源与死亡的恐惧
在研究老炼堆栈存取优化问题的基础上,提出了货位动态分组以寻求最优解的方法,并建立了以最短存取时间为优化目标的数学模型。优化模型中的约束条件包括立体仓库冗余度要求、
随着社区建设不断深入发展,社区群众对改善生活环境、提高生活质量的呼声不断高涨。党中央提出构建社会主义和谐社会的目标中也对志愿服务提出了很高的要求,做好社区志愿者工作
电子商务交易的出现,节省了交易的时间与费用,提供了以需求者为主导的服务,并解除了时间与空间的制约,为人们提供了以前想象不到的交易空间,它所具有的交易对象的不定量多数
一些发达国家在20世纪60年代前后就成功地实现了由传统农业向现代农业的转化,一些发展中国家在最近几十年加快了传统农业改造,大力发展现代农业,并取得了丰硕的成果。国内外的实
当代著名作家白先勇以明代戏剧家汤显祖"传统版"的《牡丹亭》为蓝本,创作出适应当下审美风尚的"青春版"《牡丹亭》。作为两种不同的艺术表现方式,两者在剧本内容、人物表现、
随着互联网时代的不断发展,人们对移动端应用的需求不断扩大。自2017年1月9日微信小程序正式开放,它作为新型的移动应用吸引了手机用户的眼球。微信小程序受人关注的特性就是
非真实感绘制(Non-photorealistic Rendering,NPR)是计算机图形学和图像处理中一个崭新的课题,属于计算机艺术的范畴。NPR是计算机科学与艺术的有效融合,以计算机为工具,搭建各种
抗日战争爆发后,在国民政府的大力提倡、社会舆论的强烈要求下,具备垦殖优越条件的四川积极响应国民政府的号召,在抗战期间开展了大规模的垦殖运动。国民政府为提倡垦殖颁布了一