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目的:胃癌（Gastric cancer,GC）作为人类高发肿瘤之一,是全球癌症相关致死性疾病第三大原因。胃癌发生受多种遗传和环境因素影响,其中EB病毒相关胃癌（Epstein-Barr virus associated gastric cancer,EBVa GC）约占10%。EBVa GC具有独特的致瘤特征,且具体机制尚不明确。芳香烃受体（Aryl hydrocarbon receptor,AHR）最早作为环境污染物受体而被发现,介导多种环境污染化合物如2,3,7,8-四氯二苯-对-二恶英（2,3,7,8-tetrachlo-rodibenzo-p-dioxin,TCDDs）、二苯呋喃类等在人体内的致癌过程。近期研究表明,AHR与多种人类恶性肿瘤发展有关,参与调控肿瘤细胞增殖、迁移等生物学行为,而AHR在EBVa GC中的作用尚未见报道。因此,本次研究旨在明确AHR在EBVa GC中的表达及其发挥的作用,并进一步探讨AHR受EBV调控的潜在机制。研究方法:1、运用免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）方法对38例胃癌组织石蜡切片（包括19例EBVa GC和19例EBV阴性胃癌（Epstein-Barr virus negative gastric cancer,EBVn GC））进行染色,检测AHR表达情况。同时,检测19例EBVa GC组织中潜伏膜蛋白2A（Latent membrane protein 2A,LMP2A）表达情况。2、分别选择EBVa GC细胞系（GT38、GT39、SNU719、AGS-EBV）和EBVn GC细胞系（SGC7901、AGS、BGC823）,采用实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RT-q PCR）和Western Blotting方法检测AHR及其下游靶基因细胞色素P450 1 A1（Cytochrome P450 1 A 1,CYP1A1）和细胞色素P450 1 B 1（Cytochrome P450 1 B 1,CYP1B1）表达水平。3、选择AHR内源性配体2-（1′H-吲哚-3′-羰基）-噻唑-4-甲酸甲酯（2-（1′H-indole-3-carbonyl）-1,3-thiazole-4-carboxylate,ITE）分别处理EBVa GC细胞系和EBVn GC细胞系,运用CCK8方法检测细胞增殖变化,运用transwell分析方法检测细胞迁移能力变化。4、在AGS细胞中敲低AHR表达后加入ITE,同时检测细胞增殖和迁移改变,验证ITE是否通过AHR通路而发挥相关功能。5、亚硫酸氢盐基因组测序法（Bisulfite Genomic Sequence,BGS）检测EBVa GC和EBVn GC细胞系中AHR基因启动子部分区域甲基化状态。6、在EBVn GC细胞系SGC7901中转染EBV编码LMP2A基因的重组质粒,采用RT-q PCR和WB方法检测转染效率,观察过表达LMP2A后AHR及其下游基因CYP1A1和CYP1B1的表达变化。7、在EBVa GC细胞系SNU719和AGS-EBV中转染靶向LMP2A的小干扰RNA（Small Interfere RNA,si RNA）,检测AHR及其下游基因表达水平的变化。8、使用ERK通路抑制剂PD0325901和靶向ERK1/2的si RNA作用于稳定转染LMP2A的SGC7901细胞中,检测AHR表达变化,探究LMP2A是否通过MAPK/ERK通路调控AHR表达。结果:1、AHR在EBVa GC组织高表达率仅为5.62%（1/19）,明显低于EBVn GC组织（36.84%,7/19）;19例EBVa GC中,有11例LMP2A阳性（11/19,57.9%）,且AHR均呈低表达。2、AHR及其下游靶基因CYP1A1和CYP1B1在EBVa GC细胞系的m RNA及蛋白表达均显著低于EBVn GC细胞系。3、经AHR配体ITE处理后,EBVn GC细胞系细胞增殖加快、细胞迁移能力增强,而EBVa GC细胞系细胞增殖和迁移能力均无显著改变。4、敲低AGS细胞AHR基因后,ITE的促细胞增殖和迁移作用被抑制。5、EBVa GC和EBVn GC细胞系中AHR基因启动子区均呈低甲基化状态。6、在EBVn GC细胞SGC7901中稳定转染LMP2A后,AHR及其下游基因CYP1A1和CYP1B1表达水平显著降低;而使用si RNA靶向敲低EBVa GC细胞SNU719和AGS-EBV中LMP2A基因表达后,AHR及其下游基因CYP1A1和CYP1B1表达水平增加。7、在SGC7901细胞中过表达LMP2A后,ERK通路激活;分别使用MEK1/2抑制剂PD0325901和靶向ERK1/2的si RNA阻断ERK通路活化后,AHR表达上调。结论:1、EBV感染抑制AHR在胃癌组织和细胞系中表达水平。2、EBV感染能抑制ITE通过激活AHR经典通路促胃癌细胞增殖和迁移的作用。3、LMP2A可通过激活胃癌细胞中MAPK/ERK通路抑制AHR表达。