目的:通过不同血液样本探讨Krüppel样转录因子2（Krüppel-like transcription factor 2,KLF2）、鸟苷酸结合蛋白5（guanylate-binding protein 5,GBP5）和双特异性磷酸酶3（dual specificity protein phosphatase 3,DUSP3）和结核（tuberculosis,TB）评分（（GBP5+DUSP3）/2-KLF2）在活动性肺结核（active tuberculosis,ATB）和潜伏结核感染者（latent tuberculosis infection,LTBI）中的诊断价值。为ATB和LTBI的诊断提出新的研究思路。方法:采集标本时间2019年5月1日至2020年12月31日,研究对象为就诊于青岛大学附属医院呼吸与危重医学科、青岛市黄岛区结核病防治所的住院患者、青岛大学附属医院体检中心的正常体检者。分别收集外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）:ATB组110例,肺部其他疾病组（other pulmonary diseases,OPD）114例,LTBI组52例,健康对照组63例;外周全血（whole blood,WB）队列:ATB组62例,OPD组103例,LTBI组58例,健康对照组117例,ATB治疗后组102例。用实时荧光定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）检测各组人群的GBP5、DUSP3、KLF2基因相对表达量差异。通过T-A克隆构建含GBP5、DUSP3、KLF2基因质粒标准品,并用T7体外转录合成GBP5、DUSP3、KLF2基因RNA标准品,逆转录后进行RT-PCR构建GBP5、DUSP、KLF2基因的标准曲线,测定ATB组、OPD组,LTBI组和健康对照组PBMC中的目的基因绝对表达量。使用接受者操作特性曲线（receiver operating characteristic curve,ROC曲线）分析GBP5、DUSP3、KLF2基因和TB评分在ATB和LTBI中的诊断效能。结果:1、通过对比构建pMD18-T-KLF2、pMD18-T-GBP5、pMD18-T-DUSP3质粒序列和目的基因序列,KLF2、DUSP3与测序结果完全相符,GBP5基因仅有一个碱基突变。2、KLF2、DUSP3、GBP5基因标准品的融解曲线呈单峰状态,变异系数均<3%,标准曲线的相关系数接近1.0,扩增效率接近100%。3、PBMC中ATB组的KLF2、DUSP3、GBP5表达量均高于健康对照组（P<0.05）,差异有统计学意义,OPD组DUSP3、GBP5的表达量高于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,LTBI组DUSP3基因的表达量高于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。4、PBMC中相对定量检测的DUSP3基因、TB评分、KLF2基因在区分ATB和健康对照组的曲线下面积（area under curve,AUC）分别为0.962、0.929和0.724,DUSP3基因和TB评分在区分ATB和LTBI组的AUC分别为0.805和0.771;绝对定量检测的DUSP3基因、TB评分在区分ATB和健康对照组的AUC分别为0.910和0.749。5、WB队列中KLF2基因在ATB组、LTBI组、OPD组、肺结核治疗组的的相对表达量均低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;DUSP3、GBP5基因的ATB组、LTBI组、OPD组的相对表达量均高于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,肺结核治疗组与健康对照组的差异无统计学意义（P>0.05）。6、外周血检测的结果中,鉴别ATB和健康对照组时,KLF2、GBP5、DUSP3和TB评分的AUC分别为0.979、0.763、0.859、0.999;鉴别LTBI和健康对照组,KLF2、DUSP3和TB评分的AUC分别为0.970、0.722、0.970;鉴别ATB和OPD,KLF2、DUSP3和TB评分的AUC分别为0.814、0.743、0.892;鉴别ATB和LTBI,DUSP3和TB评分的AUC分别为0.780、0.847。结论:WB队列中检测的KLF2基因和TB评分在区分ATB和OPD中的诊断效能高,且可用于鉴别LTBI和健康对照组。TB评分能区分ATB和LTBI。KLF2、GBP5、DUSP3和TB评分均可用于鉴别ATB和健康对照组。