双炔酰菌胺对烟草黑胫病的防效及抗性突变株生物学特性研究

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烟草黑胫病是由烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)引起的一种重要土传病害,每年给烟草行业带来巨大的经济损失。化学杀菌剂是当前防治烟草黑胫病的主要手段之一,但由于化学杀菌剂长期、单一、高频次的使用,黑胫病菌易对其产生抗药性。本文测定了双炔酰菌胺对烟草疫霉菌丝生长和游动孢子萌发的抑制作用,探讨了双炔酰菌胺对烟草黑胫病的防治效果以及对烟草叶片防御酶活性和MDA含量的影响。通过对敏感亲本菌株进行抗双炔酰菌胺诱变获得抗双炔酰菌胺突变菌株,比较了烟草疫霉抗双炔酰菌胺突变菌株和敏感菌株在菌丝和孢子囊形态、产孢子囊能力、游动孢子萌发能力和致病力等生物学性状的差异。主要研究结果如下:1.双炔酰菌胺对烟草疫霉的毒力测定。室内条件下测定了双炔酰菌胺对烟草疫霉菌丝生长和游动孢子萌发的抑制作用。双炔酰菌胺对烟草疫霉菌丝生长的EC50值为0.0140 mg/L;对游动孢子萌发的EC50值为0.0213 mg/L。2.双炔酰菌胺对烟草黑胫病的盆栽防效及对烟草叶片防御酶活性和MDA含量的影响。盆栽试验结果表明,双炔酰菌胺对烟草黑胫病具有较好的的防治效果,其对秦烟96、延安1号、中烟100、云烟87和本氏烟的病指防效均显著高于对照药剂代森锰锌和丁吡吗啉。酶活试验结果表明,施药后7 d和14 d,双炔酰菌胺处理的烟叶SOD活性与对照药剂丁吡吗啉差异不显著,但显著高于空白对照;POD活性显著高于对照药剂代森锰锌、丁吡吗啉和空白对照;MDA含量显著低于空白对照。施药后21 d,除了本氏烟,在其他4个供试烟草品种上,双炔酰菌胺处理的SOD活性与对照药剂丁吡吗啉差异不显著,但均显著高于空白对照;在本氏烟上,双炔酰菌胺处理后的POD活性与对照药剂代森锰锌、丁吡吗啉差异不显著,但显著高于空白对照。在云烟87、中烟100、秦烟96、延安1号品种上,双炔酰菌胺处理后的POD活性均显著高于对照药剂代森锰锌和空白对照;双炔酰菌胺处理后的MDA含量显著低于对照药剂代森锰锌和空白对照。施药后28 d,双炔酰菌胺处理的SOD活性、POD活性均显著高于对照药剂代森锰锌和空白对照;MDA含量显著低于空白对照。3.双炔酰菌胺对烟草生长的影响。测定了双炔酰菌胺等杀菌剂处理后烟株的相关生长指标。试验结果表明,施用双炔酰菌胺的处理,烟株高度显著高于对照药剂代森锰锌和空白对照;烟株茎粗和有效叶片数显著高于不施药的空白对照,但与对照药剂丁吡吗啉无显著差异。4.双炔酰菌胺对烟草黑胫病的大田防效。田间防效结果表明,双炔酰菌胺对烟草黑胫病具有较好的防治效果,其对烟草黑胫病的病指防效为64.58%,显著高于对照药剂烯酰吗啉(27.90%)。5.烟草疫霉抗双炔酰菌胺突变株的诱变。通过菌丝块紫外驯化得到3株突变菌株YCHJ2-12、YCHJ5-7和YCHJ5-16,YCHJ2-12、YCHJ5-7和YCHJ5-16的抗性水平分别是敏感亲本菌株的62.99、47.06和10.11倍。经过游动孢子紫外诱导获得了2株突变菌株YCHJ2-2和YCHJ4-13,YCHJ2-2和YCHJ4-13的抗性水平分别是敏感亲本菌株的54.79和17.75倍。测定了突变菌株的抗药稳定性,发现YCHJ2-12菌株对双炔酰菌胺的抗药性能稳定在较高水平。6.烟草疫霉抗双炔酰菌胺突变株的生物学特性。比较了烟草疫霉亲本菌株与突变菌株的菌丝形态、孢子囊形态和菌落特征,发现突变菌株和敏感亲本菌株在菌丝形态、孢子囊形态上无明显差异,但突变菌株的气生菌丝比敏感亲本菌株致密。测量了各菌株的菌丝平均生长速率,发现菌株YCHJ5-16和YCHJ4-13的菌丝平均生长速率低于亲本菌株YCHJ。测定了各菌株的产孢子囊能力,发现除突变菌株YCHJ5-7的产孢子囊能力比亲本敏感菌株弱以外,其他突变菌株的产孢子囊能力均比敏感菌株强。对突变菌株的孢子囊长、宽、梗长和乳突高度进行了测定,发现突变菌株的孢子囊长、宽、乳突高度的平均值均比亲本敏感菌株大。对突变菌株的游动孢子萌发能力和致病力进行了测定,发现突变菌株游动孢子萌发能力和致病力均下降。
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