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背景与目的高间接胆红素血症是一种常见的临床现象,影响了全球5%-10%的人口,然而,其遗传学机制尚未明确。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(Uridine diphosphate glucuronyltransferase 1A1,UGT1A1)是肝细胞中唯一参与胆红素葡萄糖醛酸化的酶,UGT1A1基因突变可降低酶的活性,引起胆红素葡萄糖醛酸化不足,从而增加血清胆红素水平。既往研究主要集中在UGT1A1基因单位点突变对高间接胆红素血症的影响,尚缺乏UGT1A1基因突变对高间接胆红素血症影响的全面认识。本研究以UGT1A1基因测序为基础,从UGT1A1基因单位点突变与复合杂合突变的角度出发,探讨Gilbert综合征及Crigler-Najjar综合征等高间接胆红素血症的遗传学基础,为高间接胆红素血症的基因诊断提供理论依据。非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病。既往研究提示氧化应激在NAFLD的发生与发展过程中均发挥着重要作用。胆红素作为强大的内源性抗氧化剂,可通过对抗氧化应激损伤,从而降低氧化应激相关疾病的风险。一些回顾性研究提示,增加胆红素水平与降低NAFLD风险有关。然而,该关联是反映了胆红素的真正的生物保护作用,还是其他因素的混淆,目前仍不明确。本研究从孟德尔随机化角度出发,分析胆红素水平及常见UGT1A1基因突变对NAFLD的影响。方法本研究共纳入418名健康体检者以及3名Crigler-Najjar综合征II型患者及其9名家属。收集其临床数据,并留取其EDTA抗凝血。对所有研究对象进行UGT1A1基因测序。分析UGT1A1基因单位点突变及复合杂合突变与高间接胆红素血症之间的关联,并从孟德尔随机化的角度探索胆红素水平及常见UGT1A1突变对NAFLD的影响。结果1.在Gilbert综合征的UGT1A1基因分析中,相对于野生型而言,UGT1A1-A(TA)6/7TAA杂合突变可增加3.11倍的高胆红素血症风险(P=0.036),而UGT1A1-c.-3275T>G不是高间接胆红素血症的独立危险因素(P=0.810),但c.-3275T>G与A(TA)6/7TAA复合杂合突变可增加4.34倍的高胆红素血症危险(P<0.001)。2.在健康体检者的UGT1A1基因分析中,5种UGT1A1基因突变[A(TA)6/7TAA、c.211G>A、c.-3275T>G、c.1091C>T及c.1456T>G]与总胆红素(TB)、间接胆红素(IB)及直接胆红素(DB)水平均显著相关,且随着UGT1A1基因突变数目的增加,TB、DB及IB水平均逐步增加。基因型分析提示,UGT1A1基因纯合突变组与复合杂合突变组的胆红素水平最高,杂合突变次之,野生型最低。3.在Crigler-Najjar综合征II型(CNS-II)的家族研究中,3名CNS-II患者均发现了3个常见的UGT1A1基因杂合突变(c.211G>A、c.-3275T>G与c.1456T>G)。未发现其他影响胆红素代谢的致病性基因突变。4.在胆红素与NAFLD的相关性研究中,UGT1A1基因常见突变[A(TA)6/7TAA与c.211G>A]可显著增加TB、DB及IB水平(P<0.001)。在二元逻辑回归模型中,A(TA)6/7TAA及c.211G>A与NAFLD的风险无关(P=0.43;P=0.19);TB、IB及DB与NAFLD的风险也无关(P值均>0.30)。结论1.在高间接胆红素血症的UGT1A1基因分析中,UGT1A1基因常见突变对胆红素水平影响存在基因叠加性效应。UGT1A1-c.-3275T>G是高间接胆红素血症的辅助因素,而非独立危险因素。2.在CNS-II家族研究中,首次报道了一种新的UGT1A1基因3位点复合杂合致病性突变(c.-3279T>G,c.211G>A和c.1456T>G)。3.在孟德尔随机化研究中,UGT1A1基因A(TA)6/7TAA和c.211G>A与胆红素水平增加有关。但UGT1A1基因突变及血清胆红素水平均与NAFLD风险无关。