天然免疫系统通过一系列感受器来检测外来感染信号。病毒核酸是一类重要的病原相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）,包括DNA和RNA。当DNA病毒感染宿主后,病毒DNA被宿主编码的模式识别受体c GAS所识别,活化后的c GAS催化ATP和GTP合成2’3’-cGAMP,2’3’-cGAMP作为第二信使与驻内质网接头蛋白MITA结合,促进MITA发生寡聚化、迁移以及激活下游转录因子IRF3和NF-kB,从而诱导I型干扰素和炎症因子的表达。泛素化修饰作为最常见的翻译后修饰之一,广泛地参与多种生物学过程。MITA的活性与稳定性同样受到泛素化修饰的严格调控。有研究表明K63链接的泛素化修饰对于MITA的活化至关重要。虽然有课题组报道TRIM32,TRIM56以及MUL1能够介导MITA发生K63链接的泛素化修饰,但在原代细胞中敲除TRIM32和TRIM56并不影响内源性MITA上K63链接的泛素化修饰;而MUL1缺乏小鼠模型中的探究。这说明在生理水平介导MITA发生这一修饰的E3泛素连接酶还并不清楚,相应的泛素化分子机制与生理学意义也有待进一步研究。在本研究中,我们首先构建了～200个人源E3泛素连接酶表达载体,然后分别与MITA进行免疫共沉淀实验。通过上述方式我们筛选到了一个与MITA相互作用的E3泛素连接酶RNF115。进一步实验表明,DNA病毒HSV-1感染诱导RNF115与MITA相互作用,敲低或敲除RNF115抑制HSV-1或胞质DNA诱导的I型干扰素及促炎因子的表达,促进HSV-1的复制;RNF115敲除小鼠对HSV-1更加敏感,血清中I型干扰素和促炎细胞因子的表达受到抑制,大脑及脾脏中HSV-1病毒载量升高。机制实验表明,RNF115促进MITA上K20/224/289位点发生K63链接的泛素化修饰,进而促进MITA发生寡聚化、迁移以及招募下游蛋白激酶TBK1,活化抗病毒免疫信号通路。另外,我们在Mita敲除的小鼠肺成纤维细胞中回补野生型MITA或MITA（3KR）,实验结果显示在回补MITA（3KR）的细胞中,HSV-1感染诱导的下游信号通路相比野生型受到显著抑制。综上所述,本研究揭示了RNF115通过促进MITA上多位点发生K63链接的泛素化修饰从而正调控抗DNA病毒天然免疫响应。