协同抑制ACC氧化酶1基因对果实成熟和病程相关基因表达的影响

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以协同抑制ACC氧化酶1的转基因番茄植株T4B-11和V1187(ACC Oxidase I co-suppression transgene tomato)、普通番茄植株(wild-tpye, WT)、乙烯反应突变体番茄Nr (never ripe)和rin (ripen inhibitor)为材料,克隆了与果实成熟及病程相关的番茄ACC氧化酶1、ACC氧化酶3、EBF1、PR1、PR5以及NP24基因片段,并以此制备探针,采用Northern杂交技术,同时进行乙烯释放量测定、果实贮藏试验、环境胁迫处理等,研究协同抑制番茄ACC氧化酶1对果实成熟相关基因和病程相关基因表达的影响,以及对内源乙烯合成和果实耐贮性的影响;环境胁迫因子以及乙烯处理对番茄ACC氧化酶1表达的影响。主要工作和结论如下: (1) 与果实成熟及病程相关的番茄基因的克隆:以NCBI上发布的番茄ACC氧化酶1基因(LeACO1)、ACC氧化酶3基因(LeACO3)、EBF1(EIN3-binding F-box 1)基因、PR1(pathogenesis-related protein 1)基因、PR5(pathogenesis-related protein 5)基因以及NP24基因序列为依据,设计引物,从普通番茄中通过PCR或RT-PCR扩增出相应的基因片段。 (2) 协同抑制番茄ACC氧化酶1对果实成熟相关基因的影响: 分别以同位素标记的LeACO1, LeACO3和LeEBF1基因片段为探针,与WT和两个协同抑制ACO1番茄株系T4B-11-11、V1187在四个果实成熟时期(IMG;MG;B;B+4)的总RNA进行杂交。从结果可知协同抑制LeACO1对内源乙烯的生物合成、果实的成熟衰老程度及LeEBF1表达具有强烈的抑制作用;LeACO1基因可能是番茄果实成熟过程中的主要调节因子,LeACO1基因被抑制的同时,也同样阻断了与果实成熟有一定相关性的LeACO3的表达。 (3) 协同抑制LeACO1对与病程相关蛋白的影响 分别以同位素标记的PR1 , NP24和 PR5基因片段为探针,与WT和协同抑制ACO1番茄株系T4B-11-11在四个果实成熟时期(IMG;MG;B;B+4)的总RNA进行杂交。结果显示,三个PR基因在WT和T4B-11-11的成熟过程中表达各异。并可推断,PR基因的表达受到内源乙烯的诱导调控。 (4) 环境胁迫和乙烯对番茄ACC氧化酶1基因表达的影响: 克隆番茄ACC氧化酶1(LeACO1)基因特异片段,以此作为探针,通过Northern杂交,结果表明,LeACO1基因的表达被干旱抑制,被复水、外源乙烯强烈诱导;淹水处理对叶片中该基因的表达无影响,而强烈诱导其在茎中的表达;37℃高温处理可以诱导LeACO1基因在番茄茎中的表达;伤害对该基因的表达没有明显影响;外源乙烯能够诱导该基因在番茄MG时期果实中表达。 总之,从本研究对协同抑制LeACO1基因对果实成熟相关基因和病程相关基因,内源乙烯合成和果实耐贮性的影响;环境胁迫因子以及乙烯处理对番茄ACC氧化酶1表达的影响进行了较为完整的阐述。
其他文献
目的:高血压是心血管疾病中使老年人致死致残的头号杀手,世界卫生组织指出,预计到2020年,因以高血压为首的心血管疾病而导致死亡的人数占全国总死亡人数的79%,高血压及其诱发症严重的威胁了人类的生命健康。琥珀酸美托洛尔为剂量依赖型的β1受体阻滞剂,缓释制剂血药浓度峰值低于同剂量的普通制剂较多,每天口服一次即可获得24小时内持续的β1受体阻滞作用,使该剂型的β1受体选择性明显提高。目前市售的缓释片剂为
研究背景 镇痛药广泛应用于各种恶性肿瘤,特别是手术后和晚期肿瘤病人的麻醉及疼痛治疗,因此,在临床上常与抗肿瘤药同时使用。但是,至今为止有关镇痛药对抗肿瘤药物疗效影响的
想象2000亿  一个数字被经常提起,那就是2000亿的市场份额。  根据2014年8月文化部文化市场司发行《2013中国艺术品市场年度报告》显示,2013年我国艺术品市场的整体成交较2012年有所回升,市场交易总额为2003亿元。  这是一个无比诱人的蛋糕,互联网的兴起让很多人看到了艺术品与互联网+的投资机会,于是,艺典中国、艺术网掌拍艺术、赵涌在线等平台纷纷借势而起。据不完全统计,目前发展中的
目的观察蛇床子素对地塞米松所致大鼠骨质疏松形成的影响及其作用机制的探讨。方法1.整体动物模型:采用SD雌性大鼠48只,随机分为溶媒对照组,地塞米松模型组,蛇床子素5,10,20