【摘 要】
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目的对人肺动脉内皮细胞（hPAECs）进行正常氧及低氧处理,观察细胞的迁移、增殖、凋亡及自噬水平变化;研究β-Arrestins1对低氧诱导的hPAECs的自噬和凋亡的潜在作用,并进一步对其相关信号通路进行初步的研究及分析。方法将hPAECs分别给予正常氧以及低氧24 h、48 h、72 h处理,观察细胞的迁移、增殖、凋亡及自噬水平;进一步干预自噬,探究其对细胞迁移、增殖、凋亡抵抗的影响。进一步通
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目的对人肺动脉内皮细胞（hPAECs）进行正常氧及低氧处理,观察细胞的迁移、增殖、凋亡及自噬水平变化;研究β-Arrestins1对低氧诱导的hPAECs的自噬和凋亡的潜在作用,并进一步对其相关信号通路进行初步的研究及分析。方法将hPAECs分别给予正常氧以及低氧24 h、48 h、72 h处理,观察细胞的迁移、增殖、凋亡及自噬水平;进一步干预自噬,探究其对细胞迁移、增殖、凋亡抵抗的影响。进一步通过干预β-Arrestins1来探究其对自噬和凋亡的影响。采用透射电镜检测自噬的形成;光学显微镜观察细胞迁移情况。然后,CCK-8检测hPAECs的增殖情况。同时,TUNEL染色观测hPAECs的凋亡情况。另外,通过Western Blotting检测自噬相关蛋白,例如LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、P62、ATG12-5,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,增殖核心抗原（PCNA）以及信号通路相关蛋白,例如p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、p-p70S6 K、p70S6 K,p-S6、S6的表达。结果与正常氧组相比,低氧使hPAECs出现高增殖及迁移改变,低氧增加了hPAECs的自噬及凋亡抵抗（P<0.05）。另外,低氧抑制β-Arrestins1及VEGFR3的蛋白表达水平（P<0.05）。而且,低氧也下调了Akt/mTOR信号通路的磷酸化水平（P<0.05）。另外,自噬抑制剂3-MA降低低氧细胞的增殖、迁移及凋亡抵抗（P<0.05）。进一步,我们干预β-Arrestins1后发现敲低β-Arrestins1加重低氧hPAECs的高增殖、迁移及凋亡抵抗;相反,过表达β-Arrestins1改善hPAECs的高增殖、迁移及凋亡抵抗。机制层面,我们发现β-Arrestins1通过Akt/mTOR信号通路抑制低氧hPAECs的自噬和凋亡抵抗。结论β-Arrestins1可能通过Akt/mTOR信号通路抑制低氧hPAECs的迁移、增殖、自噬和凋亡抵抗,这可能为肺动脉高压（PAH）的治疗提供了潜在的治疗靶点。
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