吲哚氰绿排泄试验诊断早期肝纤维化的实验研究

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吲哚氰绿(ICG)又名靛氰绿,目前已成为临床上广泛使用的一种造影剂。吲哚氰绿排泄试验(通常测定ICG15分钟潴留率)在肝脏储备功能评估和肝移植供、受体选择方面具有重要价值。吲哚氰绿是一种暗绿色的无毒色素,副作用极少,其静脉注射后被肝细胞选择性摄取,并以原形排入胆汁,ICG不参与肝肠循环,亦不经肾脏排泄,注射后连续采血,可测定其潴留率;影响吲哚氰绿清除的主要原因是肝血流量、有功能的肝细胞总数、胆汁的分泌和胆道通畅程度。除上述外,还与血浆蛋白含量、窦侧细胞膜通透性、肝细胞内载体蛋白、肝细胞向毛细胆管排泄及转运能力、毛细胆管以下胆道通畅情况有关。根据其代谢特点能够反映肝纤维化程度。本实验应用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,在肝纤维化形成过程中的不同时间测定ICG15分钟潴留率,同时采用H-E染色方法计算肝纤维化分级计分;用放射免疫法测定Ⅳ型胶原和Ⅲ型前胶原的血清含量;用免疫组化方法测定肝星状细胞活化数、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其转导通路中重要蛋白Smad3和Smad7的蛋白表达量;用RT-PCR方法测定TGF-β1、Smad3和Smad7的mRNA表达量。旨在研究上述所观察指标和ICG15分钟潴留率的相关性,探讨ICG15分钟潴留率可以作为诊断早期肝纤维化指标。本课题提出ICG排泄试验能够诊断早期肝纤维化的论点。以肝纤维化发病机制为立足点,用目前公认的诊断早期肝纤维化指标与ICG15分钟潴留率的相关性,来证明ICG15分钟潴留率能够诊断早期肝纤维化,为临床诊断早期肝纤维化寻找一可靠方法。
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